细胞核质分离

1. 服务简介

2. 实验原理与流程

▶ 实验原理

▶ 标准实验流程

1. 样品前处理：细胞样品收集计数，组织样品清洗剪碎；
2. 细胞裂解：加入预冷的低渗裂解液 / 专用核质分离裂解液，冰上孵育裂解细胞膜，保留细胞核完整性；
3. 差速离心：低速离心收集细胞核沉淀，上清即为细胞质组分；细胞核沉淀经洗涤纯化后得到纯净核组分；
4. 组分收集：分别收集细胞质组分与细胞核组分，可按需进行蛋白提取、RNA 提取或后续实验处理；
5. 纯度验证：取少量两组分样品，通过 WB 检测核标志物（如 Histone H3、Lamin B）与胞浆标志物（如 GAPDH、β-actin）的分布，验证分离效果。

3. 交付结果

1. 分离组分样品：纯化后的细胞核组分、细胞质组分（可按需提供蛋白裂解液、RNA 保存液等不同形式），干冰运输；
2. 纯度验证结果：核 / 胞浆标志物 WB 验证原始图片与定量分析，确认无明显交叉污染；
3. 完整实验报告：包含实验方法、试剂、操作步骤、样品信息、验证结果的标准化实验报告；
4. 原始数据记录：离心参数、样品浓度测定记录等原始实验数据。

4. 服务优势

1. 高纯度分离：优化的分离体系，核质分离效率高，交叉污染率＜10%，满足绝大多数后续实验要求；
2. 严格质控：每批次样品均做核 / 胞浆标志物 WB 验证，确保分离质量合格；
3. 周期高效：常规细胞样品 1-2 个工作日交付，组织样品 2-3 个工作日交付，可加急处理；
4. 灵活定制：可根据后续实验需求提供不同形式的样品（蛋白裂解液、RNA 样品、完整细胞核悬液等）；
5. 一站式服务：可搭配 WB、qPCR、Co-IP、转录组测序等后续实验，提供从样品处理到结果分析的全流程服务；
6. 样品兼容性好：支持贴壁细胞、悬浮细胞、新鲜组织、冻存组织等多种样品类型。

5. 应用场景

1. 蛋白亚细胞定位研究：验证目标蛋白在细胞核 / 细胞质中的分布与定位变化；
2. 核转录因子研究：检测转录因子入核水平、核内活性，研究信号通路核转位机制；
3. 信号通路研究：分析信号通路激活过程中蛋白的核质穿梭与分布变化；
4. RNA 亚细胞分布研究：分离核 / 胞浆 RNA，检测 RNA 的亚细胞定位与功能；
5. 核蛋白组 / 转录组研究：纯化核组分进行核蛋白组、核内转录组测序等组学研究；
6. 药物作用机制研究：检测药物处理后蛋白 / RNA 的亚细胞分布变化，解析药物作用靶点与机制。

6. 样品要求与送样说明

样品要求

1. 细胞样品：起始量≥1×10^6 个 / 样，活率＞80%，无细菌、真菌、支原体污染；贴壁细胞可直接送培养瓶，或消化后离心收集细胞沉淀送样；
2. 组织样品：起始量≥50mg / 样，新鲜组织离体后立即液氮速冻，-80℃保存，避免反复冻融；
3. 样品信息：需提供样品名称、类型、数量、后续实验用途等基础信息；
4. 特殊要求：如需特定的裂解液、蛋白酶抑制剂、RNA 酶抑制剂等特殊处理，需提前沟通。

送样说明

1. 细胞样品：常温运输（活细胞）或干冰运输（细胞沉淀）；组织样品：干冰运输；
2. 送样时请附带样品信息单，注明样品名称、数量、分组、分离要求与后续用途；
3. 收到样品后 24 小时内完成样品质检，不合格样品将及时沟通重寄。