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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 服务名称:
细胞STR鉴定
- 规格:
株
1. 检测说明
本检测采用STR 短串联重复序列分型技术,对细胞基因组 DNA 进行扩增、毛细管电泳分型,通过人源特异性 STR 基因座比对,判定细胞人源属性、细胞身份唯一性,同时排除细胞交叉污染,是国际通用细胞金标准鉴定方法,结果可用于论文投稿、课题结题、项目验收。
检测依据:人细胞标准 STR 分型规范,采用商品化人类 STR 复合扩增试剂盒,测序仪毛细管电泳读取基因分型图谱。
2. 样品基础信息
样品性状:人源细胞系
检测项目:人类 STR 基因分型鉴定
检测样本数量:1 份
检测签发形式:电子版 + 纸质鉴定报告,附带原始分型峰图文件
3. 报告通用免责说明
- 报告仅针对本次送检细胞样本有效,不代表同批次其他细胞;
- 未经授权不得将报告用于广告、商业评比、资质认证;
- 对检测结果存疑需收到报告 15 个工作日内书面反馈,逾期不予复核;
- 涂改、无盖章复印件不具备参考效力,遗失不免费重出报告;
- 检测数据仅作科研参考,检测机构保留报告修订、更新标准的权利。
二、实验材料与仪器
1. 核心试剂
- 基因组 DNA 提取试剂盒
- 人类多基因座 STR 复合扩增试剂盒
- 2×PCR 扩增 Mix、无菌去离子水
- 内标 Marker、电泳缓冲液、上样缓冲液
2. 实验仪器
PCR 扩增仪、高速冷冻离心机、紫外分光光度计、毛细管电泳遗传分析仪、凝胶成像系统
三、标准化实验流程
- 基因组 DNA 提取
收集细胞沉淀,试剂盒法提取完整基因组 DNA;分光光度计检测 DNA 纯度,OD260/280 控制在 1.7–2.0,琼脂糖电泳验证 DNA 无降解、浓度达标。
- STR 特异性 PCR 扩增
采用人源专用 STR 引物组合,同步扩增多个人类特异性 STR 基因座(包含 D3S1358、vWA、D8S1179、D21S11、D18S51、Penta E、D5S818、D13S317、D7S820、D16S539、CSF1PO、Penta D、TH01、TPOX、D19S433 等高区分度位点);设置阴性对照、阳性对照排除污染。
- 毛细管电泳分型
PCR 产物经纯化后上机毛细管电泳,采集荧光分型峰图,软件读取各基因座等位基因片段大小。
- 数据库比对判定
将样本 STR 分型数据与人细胞标准参考图谱比对,计算匹配度;同步判断是否存在小鼠、大鼠等异种细胞交叉污染。
四、通用判定标准 & 实验结果
- 人源判定:所有扩增位点均出现人类特异性等位基因峰,无啮齿类非特异扩增条带,确定为人类细胞;
- 细胞纯度判定:各 STR 位点仅出现 1–2 个等位峰,无额外杂峰,无其他细胞交叉污染;
- 匹配结论:样本 STR 分型与对应细胞标准分型完全匹配,位点匹配率 100%,细胞身份准确无误;
- 输出资料:完整 STR 分型数据表、原始电泳峰图、正式鉴定报告。
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文献和实验相关实验
据统计约 30% 细胞系被交叉污染或错误辨识,因使用了交叉污染或错误辨识的细胞而导致研究结论错误、结果不可重复、临床细胞治疗灾难性后果……,这浪费大量时间、精力和金钱。Everything was going along fine until they discovered their HeLa cell line expressed Y chromosome markers因此近年 NIH、ATCC、Nature 和 Science 等对此多次发出呼吁,要求研究者对细胞进行鉴定。STR 基因
关于如何鉴定收到的新细胞是否有污染,很多站友,特别是新接触细胞培养的站友通常没有太多经验,在此我分享下我这边接收到新细胞后是如何判断是否有污染的。一、肉眼观察以下几项:1. 细胞瓶身:如果瓶身上没有裂缝,正常;如果瓶身上有裂缝,则污染几率非常大。2. 培养基颜色:如果培养基颜色是红色或者粉色,正常;如果是橙色,则可能是污染或者细胞过密;如果是黄色,则污染几率非常大。3. 培养基澄清度:如果培养基澄清,正常;如果有少许漂浮物,则可能是污染或者有细胞凋亡;如果培养基很浑浊,甚至出现絮状物,则污染
手把手教你单细胞测序分析时如何运用多种数据库和参考文献定义每种类型的细胞群。
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