PCR反应

PCR 反应体系的循环参数

1、变性温度和时间： 模板 DNA 和 PCR 产物的变性不充分是 PCR 失败的主要原因。适宜的变性条件是 95℃ 30s 或 97℃15s。变性不完全，DNA 双链会很快复性，因而减少产量。在变性中，温度太高或反应时间过长，会导致酶活性的损失。Taq DNA 聚合酶活性的半寿期：92.5℃为 2h 以上，95℃为 40min，97℃为 5min。 2、复性温度和时间： 复性温度决定 PCR 的特异性，而引物退火温度和所需时间长短取决于反应体系中的基本组成及扩增引物的长度和浓度，实际使用

PCR基因芯片上荧光PCR反应的研究

基因芯片技术具有快速多样、微型化和自动化等特点在生物医学领域广泛的应用。但由于其基本原理是基于核酸杂交技术，有着内在的缺陷，实验的敏感性和重复性都存在一定问题。核酸杂交较适合于检测基因的表达，不易检测基因组DNA的基因的重排，突变和缺失。而大多数肿瘤性疾病和一些遗传变异和表型的改变与后者有关。为了解决上述问题，我们将芯片技术与荧光PCR技术相结合，设立设计一种含有大量微反应池的PCR基因芯片，以期能快速、准确的对基因的重排，突变和缺失等基因变异进行检测。常规PCR反应产物的检测是电泳后观察获得

实时 PCR 反应的三个阶段及其重要性

Taq Talk 荧光定量 PCR 系列课程之【实时 PCR 反应的三个阶段及其重要性】一起 get 实时 PCR 反应的三个阶段及其重要性，以及哪个阶段更能代表初始模板的量，原因又是什么？