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文献和实验及LambdaFabSelect的填料分别作用于Kappa类型和Lambda类型轻链抗体的轻链稳定区,可用于包含相关区域的抗体片段的纯化 (表10)。 表10 常见抗体及抗体片段纯化填料类型及其特点 族特异亲和填料 某些配基可以与某类生物分子发生特异的亲和作用。将这些配基偶联到填料之上,便形成了族特异性填料。如果涉及细胞因子、白蛋白、糖蛋白之类样品的分离纯化时,除了常用的离子交换层析和凝胶过滤层析之外,族特异性亲和填料也是一种选择 (表11)。 表11 常见组特异性亲和填料及其能结合的分子 3. 预活化填料 目的
大阪大学蛋白质研究所藤井勇树、高木淳一东北大学大学院医学系研究科金子美华、加藤幸成 前言在分析蛋白质的功能时最重要的是如何得到高纯度的蛋白。现今提纯蛋白最常用的方法是亲和标签系统。被统称为「Epitope Tag」的肽标签以及其单克隆抗体组成的系统有FLAG、HA、Myc等多种标签。但是,每个标签系统都有优缺点,并不存在完美的标签系统。于是,在克服了众多难关后我们终于开发出有超高亲和性的新型亲和标签系统“PA Tag System”1)。 PA tag的起源Epitope Tag
性(图1)。NuPAGE® 样品缓冲液的pH值不会低于pH 8(即使是加热到70°C),因此样品制备过程中蛋白样品不会降解。 图1. 看看NuPAGE® 凝胶的与众不同之处。(A) NuPAGE® 凝胶利用1×MES缓冲液运行。(B) tris-甘氨酸凝胶利用tris-甘氨酸/SDS缓冲液运行。图片显示,与tris-甘氨酸凝胶相比,NuPAGE® 凝胶产生锐利、完整的条带,代表了未水解的蛋白,特别是在第3、5、7、8和9道。 样品上样:(1) Mark12™
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