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- 详细信息
- 用户评价
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
20%乙醇4-8℃保存
- 保质期：
3年
- 英文名：
Streptavidin Berpharose FF
- 库存：
大量
- 供应商：
北京博尔西科技有限公司
- 规格：
10ml
链霉亲和素琼脂糖凝胶FF
（Streptavidin Berpharose FF）
1.产品介绍
链霉亲和素琼脂糖凝胶FF（Streptavidin Berpharose FF）是一种将链霉亲和素（Streptavidin）键合在琼脂糖凝胶微球上形成的亲和层析分离介质，利用生物素与链霉亲和素配体之间的相互作用分离纯化生物素或生物素化的抗原、抗体、核酸等物质。
链霉亲和素与生物之间的亲和力很强，需要在变性条件下洗脱，这个特性可用于抗原与抗体的分离，如将生物素化的抗体结合在凝胶上，然后利用抗原抗体的亲和特性纯化无生物素化的抗原，抗原洗脱时抗体不会被洗脱。链霉亲和素对亚氨基生物素的亲和力相对较弱，可以在pH9.5-11.0结合，pH4.0时洗脱，不需要使用变性剂所以能更好的保持亲和素偶联物的活性。
2.规格
1ml（预装柱）、5ml（预装柱）、10ml、20ml、100ml、500ml
3.产品性能
| 性能 | 指标 |
| 基质 | 6%琼脂糖微球 |
| 配基 | 链霉亲和素（Streptavidin） |
| 配基密度 | 5mg/ml |
| 载量 | ≥300nmol生物素/ml ≥6mg生物素化蛋白/ml |
| 粒径 | 45-165μm |
| 流速/*大流速 | 15-100 /700 cm/h |
| 耐反压 | 0.3MPa |
| pH稳定范围 | 短时间pH2-11 长时间pH4-9 |
| 储存缓冲液 | 20%乙醇 |
| 储存温度 | 4-8℃ |
①缓冲液:
（1）纯化生物素或生物素化物质
结合缓冲液：20mM NaH2PO4, 150mM NaCl， pH7.4
洗脱缓冲液：8M 盐酸胍，pH1.5
（2）纯化2-亚氨基生物素或2-亚氨基生物素标记的物质
结合缓冲液：50mM 碳酸铵，500mM NaCl，pH10.0
洗脱缓冲液：50mM 乙酸铵，500mM NaCl，pH4.0
（3）纯化抗原或抗体
结合缓冲液：20mM NaH2PO4，150mM NaCl，pH7.4
洗脱缓冲液：100mM 甘氨酸-盐酸，pH3.0
注：
用于生物素化的抗体纯化未生物素化的抗原（或生物素化的抗原纯化未生物素化的抗体）有2 种方法，①可先在游离状态下抗原与抗体结合，然后当样品纯化即可；②也可以将生物素化的抗体（或抗原）先结合柱上，然后对应的未生物素化的抗原（或抗体）当样品纯化。
②样品准备
上柱的样品应尽量保持与结合缓冲液一致。通常可用透析、超滤、稀释等方法处理样品。并且上柱前应过0.45μm 滤膜或高速离心去除不溶物。
③样品纯化
（1）取适量的链霉亲和素琼脂糖凝胶FF 装入合适的层析柱中，用结合缓冲液平衡5 个柱体积，建议流速为100cm/h。
（2）将准备好的样品缓慢上柱，为保证样品与链霉亲和素充分结合，应控制好上样流速，建议流速为15-50cm/h。
（3）上样后用结合缓冲液平衡10 个柱体积以上，或平衡至基线，洗去杂质，推荐流速为100cm/h。
（4）用洗脱缓冲液洗10-20 个柱体积，建议流速为100cm/h，收集的洗脱液应立即调节pH 至稳定范围，并根据需要置换缓冲液。
（5）洗脱目的蛋白后的柱子应立即用中性的结合缓冲液平衡，并用20%乙醇保存柱子，或进行下一次纯化。
6. 注意事项：
1) 使用时保证柱子和缓冲液的温度一致，避免柱床内产生气泡，影响纯化效果。
2) 去除一些沉淀或变性物质，建议使用下面的方法用2倍柱体积的0.1M NaOH或6M盐酸胍或8M尿素溶液进行清洗，然后立即用 5倍柱体积的PBS，pH7.4清洗。去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质3-4倍柱体积70%乙醇或2倍柱体积的1% TritonX-100清洗，然后立即用5倍柱体积的PBS，pH 7.4清洗。
3) 本产品保存条件为20%乙醇，4~8℃。
4) 2-25℃,常压,避光运输。
5) 仅供科研实验使用。
层析柱(预装柱)填料目录：
亲和层析填料(预装柱)
★蛋白A琼脂糖凝胶 FF (Portein A Berpharose FF)
★蛋白G琼脂糖凝胶 FF (Portein G Berpharose FF)
★耐碱蛋白A琼脂糖凝胶 FF (rat-Portein A Berpharose FF)
★蛋白A蛋白G琼脂糖凝胶 FF (Portein AG Berpharose FF)
★镍-琼脂糖凝胶FF (Ni- Berpharose FF)
★链霉亲和素琼脂糖凝胶 FF (Streptavidin Berpharose FF)
★Strep-Tactin琼脂糖凝胶 FF (Strep-Tactin Berpharose FF) (StrepII标签蛋白纯化)
★肝素-琼脂糖凝胶 FF (Heparin- Berpharose FF)
★大豆胰蛋白酶抑制剂琼脂糖凝胶 FF (STI- Berpharose FF)
内毒素清除琼脂糖凝胶 (Endotoxin Removal Reagent Berpharose)
GST-琼脂糖凝胶FF (GST Berpharose FF)
钴-琼脂糖凝胶FF (Co- Berpharose FF)
真菌毒素检测免疫亲和柱
黄曲毒素（总量：B族G族、M1、B1）- 免疫亲和柱 (AFT-IAC)
赭曲霉毒素A-免疫亲和柱 (OTA-IAC)
玉米赤霉烯酮-免疫亲和柱 (ZEA-IAC )
脱氧雪腐镰刀菌烯醇（呕吐毒素）-免疫亲和柱 (DON-IAC)
T-2毒素-免疫亲和柱 (T-2 toxin-IAC)
伏马毒素-免疫亲和柱 (FB1、FB2、FB3-IAC)
活化填料
NHS活化琼脂糖凝胶 FF (NHS Activated Berpharose FF)
环氧活化琼脂糖凝胶 FF ( Epoxy Activated Berpharose FF)
离子交换层析填料(预装柱)
DEAE-琼脂糖凝胶 FF（DEAE Berpharose FF）
Q-琼脂糖凝胶FF（Q Berpharose FF）
CM-琼脂糖凝胶FF（CM Berpharose FF）
SP-琼脂糖凝胶FF（SP Berpharose FF）
DEAE、Q、CM、SP（预装柱套装4支）
疏水层析填料(预装柱)
苯基-琼脂糖凝胶 FF（Phenyl Berpharose FF）
辛基-琼脂糖凝胶 FF（Octyl Berpharose FF）
丁基-琼脂糖凝胶 FF（Butyl Berpharose FF）
苯基、辛基、丁基（预装柱套装3支）
凝胶过滤层析填料(预装柱)
| 型号 | 分离范围 |
| 琼葡糖凝胶G10 | <700 |
| 琼葡糖凝胶 G15(脱盐柱) | 100-1500 |
| 琼葡糖凝胶 G25 (脱盐柱) | 1000-5000 |
| 琼葡糖凝胶 G50 | 1000-30000 |
| 琼葡糖凝胶 G75 | 3000-80000 |
| 琼葡糖凝胶 G100 | 4000-120000 |
| 琼葡糖凝胶 G150 | 5000-300000 |
| 琼葡糖凝胶 G200 | 5000-600000 |
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用户评价
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文献和实验，在中性和弱碱性条件下可以和固定化的金属离子相互作用(如Ni离子，Zn离子，Co离子等)，从而达到纯化蛋白的目的。此系统的洗脱方式可以用过三种非特异性步骤达成： 降低pH（4.5-6） b. 加入EDTA C.不同浓度咪唑溶液（20-250mM） 当蛋白洗脱完毕后，使用EDTA使纯化树脂与金属离子分离，即可完成树脂的再生。 Strep-tag®则是基于链霉亲和素(Streptavidin)和生物素这一自然的相互作用，将Strep-tag®II（WSHPQFEK）或Twin-Strep-tag®
是以 6 个组氨酸残基组合的融合标签，其基于蛋白质表面的组氨酸残基侧链，在中性和弱碱性条件下可以和固定化的金属离子相互作用（如 Ni 离子，Zn 离子，Co 离子等），从而达到纯化蛋白的目的。 此系统的洗脱方式可以用过三种非特异性步骤达成：① 降低 pH（4.5～6）；② 加入 EDTA；③ 不同浓度咪唑溶液（20～250 mM）。当蛋白洗脱完毕后，使用 EDTA 使纯化树脂与金属离子分离，即可完成树脂的再生。 Strep-tag® 则是基于链霉亲和素（Streptavidin）和生物素这一自然的相互
琼脂糖凝胶电泳片断回收的常用方法20世纪70年代是一个奠定现代分子生物学的时代，1973年冷泉港实验室的Joseph Sambrook和Phillip Sharp发明了利用琼脂糖凝胶分离DNA 和EB染料观测DNA 相结合的技术。现在，琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳是分离、鉴定和纯化核酸和蛋白质片断的标准方法。这里首先介绍的是琼脂糖凝胶电泳片断回收的常用方法：1.柱回收试剂盒：可谓目前最简单快速的回收方法，只需要将电泳凝胶中的产物条带切下，用溶解Buffer彻底溶解，上包埋有纯化填料的纯化柱，离心
