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- 噬菌体免疫沉淀测序(Phage immunoprecipitation sequencing，PhIP-seq)技术是近年来新兴的一项高通量筛选的技术，联合高容量的噬菌体展示多肽库、抗体免疫沉淀以及高通量测序技术，可进行基干抗原-抗体匹配的、全局性、系统性的抗体库(Antibody repertoire)分析，是抗体组学(Antibodyomics)研究的有力工具。
- 中国上海
- 2025年12月28日
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PhIP-Seq噬菌体免疫沉淀测序技术
噬菌体免疫沉淀测序(Phage immunoprecipitation sequencing，PhIP-seq)技术是近年来新兴的一项高通量筛选的技术，联合高容量的噬菌体展示多肽库、抗体免疫沉淀以及高通量测序技术，可进行基干抗原-抗体匹配的、全局性、系统性的抗体库(Antibody repertoire)分析，是抗体组学(Antibodyomics)研究的有力工具。
技术原理
多种ready-to-use噬菌体展示肽库
应用案例
Bourgonje等利用PhIP-Seq研究了IBD患者和非IBD个体中对344,000种微生物、食物和自身抗原的血清抗体反应，发现了与IBD和特定疾病特征相关的特异抗体反应[2]。
Shrock等利用PhIP-Seq进行了高精度的表位分析，揭示了人群中“公共表位”及其与抗体基因序列之间的相关性，建立了抗体基因-公共表位-免疫个体差异的联系[3]。
样本类型和要求
血清/血浆：> 20 μL；其它体液：如脑脊液，组织液，视抗体浓度而定。
参考文献
[1] Larman HB, Zhao Z, Laserson U, et al. Autoantigen discovery with a synthetic human peptidome. Nat Biotechnol. 2011 May 22;29(6):535-41.
[2] Bourgonje AR, Andreu-SánchezS, Vogl T et al. Phage-display immunoprecipitation sequencing of the antibody epitope repertoire in inflammatory bowel disease reveals distinct antibody signatures. Immunity. 2023 May 4:S1074-7613(23)00185-1.
[3] Shrock EL, Timms RT, Kula T, et al. Germline-encoded amino acid-binding motifs drive immunodominant public antibody responses. Science. 2023 Apr 7;380(6640):eadc9498.
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文献和实验[1] Larman HB, Zhao Z, Laserson U, et al. Autoantigen discovery with a synthetic human peptidome. Nat Biotechnol. 2011 May 22;29(6):535-41.
[2] Bourgonje AR, Andreu-SánchezS, Vogl T et al. Phage-display immunoprecipitation sequencing of the antibody epitope repertoire in inflammatory bowel disease reveals distinct antibody signatures. Immunity. 2023 May 4:S1074-7613(23)00185-1. [3] Shrock EL, Timms RT, Kula T, et al. Germline-encoded amino acid-binding motifs drive immunodominant public antibody responses. Science. 2023 Apr 7;380(6640):eadc9498.
[3] Ming-Hao Dong, Zhi-Cheng Mei, Luo-Qi Zhou, et al. Anti-BCMA CAR-T cell therapy in relapsed/refractory chronic inflammatory demyelinating polyneuropathy, Med, 2025, 100704, ISSN 2666-6340
Hanks液的小平皿内，用钝头直角9号注射器针头破少许脾被膜后，赶出细胞，用毛细吸管轻轻吹散细胞团后，将悬液通过250目尼龙网，取滤液，1000r/min离心5min，Hanks液洗涤3次，计数细胞后，用1640液重新悬浮细胞，配成所需浓度； （4）往各孔中加入0.5ml含不同浓度（104-106/ml）的细胞悬液，置37℃，5％CO2条件下孵育2-4h，甩去培养液，PBS-T洗涤3次，每次3min； （5）往各孔中加入0.5ml生物素化抗体（Bio-Ab）（2μg/ml），37℃
摘要：目的 探讨ENA多肽抗体谱与LE细胞（LEC）检查在SLE、ITP及肾炎之间检测结果的关系。方法 对同一病人应用免疫印迹法检测ENA多肽抗体谱以及用改良血块法检查LE细胞共136例（SLE78例、ITP22例、肾炎36 例）。结果 在52例LEC阴性SLE患者中，ENA多肽抗体谱总阳性率为80.0% （42/52）；在26例LEC阳性SLE患者中ENA多肽抗体谱总阳性率为88.5%（23/26），二者比较无显著性差异（X2= 2.58）。78例SLE患者ENA多肽抗体谱总阳性率85
提要 应用免疫印迹技术（IBT），对临床63例常见免疫性疾病进行了检查。其中，疾病组48例，主要为SLE等自身免疫性疾病，对照组15例。同时观察了荧光ANA、dsDNA、LBT的结果。疾病组抗ENA抗体阳性率为58.3%，同一患者可有2～3种抗体。FANA阳性率为54.2%，dsDNA 阳性率为18.8%，LBT阳性率为50%，对照组1例阳性（6.7%）。SLE33例中ENA 阳性率为66.7%，主要是RNP和Sm抗体。其中Sm抗体与FANA斑点型显著相关（P 《可提核抗原多肽抗体谱的临床检测
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