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吉满生物
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吉满的AAV相关产品是由表达质粒(编码目的基因以及两个ITR序列组成),辅助质粒(Cap和Rep基因)以及腺病毒Helper质粒(腺病毒基因产物)构成。通过将三种质粒转染到宿主细胞,来复制和包装AAV病毒。所获得的病毒颗粒经过超速离心纯化和滴度检测,可以满足不同实验的使用需求。
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简介
根据客户提供的基因信息和确定的干扰序列,合成shRNA,并将其连接到腺相关病毒载体上,通过包装获得目的基因的干扰腺相关病毒。也可根据客户提供的基因信息设计并构建3靶点shRNA,筛选有效干扰靶点后进行腺相关病毒的包装。
吉满的AAV相关产品是由表达质粒(编码目的基因以及两个ITR序列组成),辅助质粒(Cap和Rep基因)以及腺病毒Helper质粒(腺病毒基因产物)构成。通过将三种质粒转染到宿主细胞,来复制和包装AAV病毒。所获得的病毒颗粒经过超速离心纯化和滴度检测,可以满足不同实验的使用需求。
特点
(1)宿主范围广:具有广泛的宿主范围,可以感染分裂细胞和非分裂细胞;
(2)多种血清型:rAAV有十多种常用的血清类型,不同血清型对不同的脏器有较高的感染力,包括AAV1, AAV2, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8, AAV8-2M, AAV9, AAV-DJ, AAV-DJ/8, AAVrh10, PHP.S, PHP.eB等;
(3)滴度高:可以生产出1×1013 vg/mL的高滴度病毒;
(4)安全性高:迄今从未发现野生型AAV对人体致病,重组AAV基因组序列上去除了大部分的野生型AAV基因组元件,进一步保证了安全性;
(5)准确性高:表达出的蛋白质可以正确的折叠和修饰;
(6)表达稳定:rAAV不会整合到基因组上,可以长期稳定的表达外源基因;
(7)免疫原性低:基本不引起机体免疫排斥和炎症反应,体内存留时间较持久。
服务流程

案例展示
案例1 使用吉满生物提供的腺相关病毒(AAV-shIRF4,Genomeditech)抑制IRF4的表达后,缓解了狼疮小鼠的疾病进程 (Signal Transduct Target Ther(IF:13.493;Q1).2023 May 22;8(1):188.)

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文献和实验【1】Propionate alleviates itch in murine models of atopic dermatitis by modulating sensory TRP channels of dorsal root ganglion,复旦大学附属华山医院,IF=12.4002,Allergy
【2】Hepatic cytochrome P450 8B1 and cholic acid potentiate intestinal epithelial injury in colitis by suppressing intestinal stem cell renewal,中国科学院上海药物研究所,IF=25.2698,Cell Stem Cell.
【3】PXR activation impairs hepatic glucose metabolism partly via inhibiting the HNF4α–GLUT2 pathway,中国药科大学药学院,IF=14.903,Acta Pharmaceutica Sinica B
产品技术背景 pRI系列载体是基于III类RNA聚合酶启动子:人类H1启动子的专用于哺乳动物细胞RNA干扰的载体。H1启动子在哺乳动物细胞内合成类似siRNA分子的小分子RNA。由于H1启动子有精确的转录起始位点和终止信号,H1启动子转录产物精确生成人工设计的shRNA,shRNA经过RISC剪切后形成有2个U突出末端的成熟siRNA。由于H1启动子对转录产物长度的严格限制,基本上杜绝了非特异性干扰片段的产生,将载体转染细胞后对其它基因的影响降到最低。 pRI系列载体已经成功用于多种
RNA干扰载体主要用来研究基因表达调控,RNA干扰技术已已被广泛用于基因结构功能研究和传染性疾病及基因治疗领域,进行RNA干扰实验首先是构建RNA干扰载体,本文以pRI系列载体为例论述了干扰载体的构建的实验流程。 产品技术背景 pRI系列载体是基于III类rna聚合酶启动子:人类H1启动子的专用于哺乳动物细胞RNA干扰的载体。H1启动子在哺乳动物细胞内合成类似siRNA分子的小分子RNA。由于H1启动子有精确的转录起始位点和终止
设计:客户提供靶基因名称、序列或GeneBank ID号 2) shRNA载体构建(靶基因4个,阴性对照1个,阳性对照1个) 3) 质粒扩增、纯化 4) 转染靶细胞(客户提供靶细胞及其培养方法等相关资料) 5) 抑制效果检测:实时荧光定量PCR检测mRNA表达,Western Blot检测蛋白表达 6) 提供实验报告:shRNA序列、测序报告、荧光定量PCR报告、WB报告等。 ■ 慢病毒介导的RNA干扰
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