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- 2026年01月06日
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RNAi介导的目的基因的Knock down是与过表达技术相对应的另一种强有力的生物学研究手段[1]。通过降低目的基因的表达，而研究该基因的生物学功能。RNAi更是因为其方便高效的特点广受关注。上海世翱采用U6或H1启动子的shRNA表达载体，可以在细胞内直接转录出shRNA，行使其RNAi功能，GFP可以监测转染效率，抗性基因可以用于药物压力下细胞稳定株筛选，能够解决化学合成的siRNA干扰时间短的缺点[2,3]。同时提供用于RNA干扰实验的腺病毒载体(Adenoviral vector)和慢病毒载体(Lentiviral vector)构建服务。我们根据客户提供的基因ID设计3-4个siRNA靶点并安排引物合成，把单链的引物退火成双链oligo序列，连接入双酶切线性化的RNA干扰载体，测序验证正确的shRNA干扰载体，进行质粒抽提。shRNA干扰载体后续可以进行转染实验、病毒包装实验、稳定株筛选实验等。
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文献和实验相关实验
近年来的研究表明,一些短片断的双链RNA可以通过促使特定基因的mRNA降解来高效、特异的阻断体内特定基因表达,诱使细胞表现出特定基因缺失的表型, 称为RNA干扰（RNA interference,RNAi）.siRNA（small interfering RNAs）就是这种短片断双链RNA分子,能够以序列同源互补的mRNA为靶目标,降解特定的mRNA.RNAi的发现具有划时代的意义,它不仅深入揭示 了细胞内基因沉默的机制,而且它还是后基因组时代基因功能分析的有力工具,极大地促进了人类揭示
1、载体基本介绍 2、载体分类及应用 3、载体构建及应用注意事项
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