首页 » 技术服务 » 分子生物 » RNAi全套服务 » shRNA干扰载体构建

shRNA干扰载体构建

shRNA干扰载体构建
技术资料: 免费索取技术资料
 丁香通采购保障计划,让您的采购更放心。查看详情

供应商信息

和元生物技术(上海)股份有限公司
商家诚信度:
成立时间:2013
入驻丁香通年限:5年
商家等级:金牌客户
产品信息完整度:63%
联系人:毛女士 点击这里给我发消息

若您通过QQ未能联系到商家,您可以给商家发送站内信,与其取得联系。

扫一扫
微信联系商家

邮件: mlh@oobio.com.cn

手机:13501676670

电话:021-31601005

地址:上海市浦东新区国际医学园区紫萍路908弄19号楼

该商家已通过实名认证
 

产品详情

地区: 上海
简介: 和元以Oct-4基因为例,设计针对human Oct-4的shRNA干扰片段。通过分子生物学手段将该干扰片段构建入慢病毒载体(pLenti-U6-shRNA-CMV-EGFP-T2A- Puro)的U6启动子下游,该载体可以实现在干扰Oct-4基因的同时表达绿色荧光蛋白EGFP和puromycin抗性基因
提供商: 和元生物
服务名称: shRNA质粒构建
规格: 按周期

摘要:和元设计针对human Oct-4的shRNA干扰片段。通过分子生物学手段将该干扰片段构建入慢病毒载体(pLenti-U6-shRNA-CMV-EGFP-T2A- Puro)的U6启动子下游,该载体可以实现在干扰Oct-4基因的同时表达绿色荧光蛋白EGFP和puromycin抗性基因,前者便于观察载体工作状态,后者方便筛选Oct-4干扰的稳定细胞株。除了可以直接瞬时转染细胞用于Oct-4基因的干扰,该载体更可以包装慢病毒,用于稳定株的筛选以及在动物水平干扰Oct-4基因的表达。
关键词:Oct-4,RNAi, shRNA, EGFP, puromycin, lentivirus vector

一、 实验原理
RNA干扰(RNA interference, RNAi)是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。由于使用RNAi技术可以特异性剔除或关闭特定基因的表达,所以该技术已被广泛用于探索 基因功能和传染性疾病及恶性肿瘤的基因治疗领域。shRNA作为RNA干扰的一种方法,是利用人源和鼠源的U6和H1等RNA聚合酶Ⅲ(pol Ⅲ)启动子转录短的干扰RNA (siRNA, 19-21个核苷酸的RNA 双链)的DNA分子。细胞内转录的shRNA被Dicer enzyme加工后掺入RNA诱导的沉默复合物(RNA-induced silencing complex, RISC),引导核酸酶降解靶RNA。
shRNA表达载体的优点在于可以进行较长期研究——带有抗生素标记的载体可以在细胞中持续抑制靶基因的表达,持续数星期甚至更久。病毒载体也可用于 siRNA表达,其优势在于可以直接高效率感染细胞进行基因沉默的研究,避免由于质粒转染效率低而带来的种种不便,而且转染效果更加稳定。
所选用的干扰载体pLenti-U6-shRNA-CMV-EGFP-T2A-Puro载体图谱如下。用Age I和EcoR I酶切切去U6启动子下游的ccdB毒性基因,插入待构建的shRNA序列。

二、 实验目的
和元构建带有EGFP荧光标记和puromycin抗性基因标记的human Oct-4干扰慢病毒载体。

                                                                

三、 实验步骤
和元上海根据human Oct-4基因的转录本设计3到4个siRNA靶点,安排引物合成。将单链的引物退火成双链oligo序列,连接入双酶切线性化的RNA干扰载体,替换掉 原来的ccdB毒性基因。菌落PCR筛选转化子,筛选的的阳性克隆进行测序验证。测序验证正确的克隆,进行高纯度质粒抽提。实验共分以下8个主要步骤:
1. 干扰靶点设计和引物合成:
和元根据shRNA设计的一般原则以及和元生物的丰富经验,设计3到4个siRNA靶点,安排引物合成。
2. 引物退火形成带粘性末端的双链片段:
和元将合成好的oligo用oligo annealing buffer溶解成20μM,互补单链各取30μL混合。然后将oligo混合物在水浴锅中95℃加热5min,然后水浴锅开盖置室温中自然冷却至室温, 形成双链oligo片段。取1μL用于后续的连接反应,其余-20℃保存。
3. 线性化表达载体的制备:
和元用限制性内切酶对表达载体的进行酶切,酶切反应体系为:质粒2μg,10 x反应Buffer 5μL,限制性内切酶各1μL,用水补足50μL,于37℃水浴锅中孵育2h以上。酶切产物进行进行琼脂糖凝电泳检测酶切效果,并把目的载体条带从琼脂糖 凝电泳后的胶中割下来,用TaKaRa MiniBEST Agarose Gel DNA Extraction Kit Ver.3.0做胶回收,具体步骤参考试剂盒说明书。。
4. 干扰片段连接入表达载体:
和元连接反应体系

试剂 阳性对照( µl ) 自连对照( µl ) 连接组( µl )
退火的双链oligo  10mM 1 - 1
线性化的干扰载体40ng/µl 3 3 3
10×T4 DNA ligase Buffer 2 2 2
T4 DNA ligase 1 1 1
dd H2O Up to 20 Up to 20 Up to 20

 

 

 




于16℃ 连接过夜。
说明:阳性对照所加的退火的双链oligo是以前退火好的验证好用的片段,和连接组所加的退火的双链oligo长度一样,但序列无关。
5. 感受态细胞的转化:
和元的DH5a感受态细胞的转化,详见《精编分子生物学实验指南》②
6. 菌落PCR鉴定阳性转化子:
和元将挑取平板上长出的转化子重悬于10µl LB培养液中,取1µl做模板进行菌落PCR鉴定。反应体系和PCR循环条件如下:

 

7. 阳性克隆送测序:
和元菌落鉴定得到的阳性克隆,送测序公司进行测序验证。用VectorNTI软件比对测序结果,对测序结果进行分析。
8. 质粒小提:
和元测序通过的阳性克隆,安排质粒小提。具体步骤见试剂盒说明书。

四、 和元生物实验结果
1. siRNA 序列和引物合成
siRNA 序列:
 

病毒载体构建框架: 



 DNA引物片段:
pY1001-1  CCGGAGAAAGAACTCGAGCAATTcTCAAGAGAAATTGCTCGAGTTCTTTCTTTTTTTg
pY1001-2  AATTCAAAAAAAGAAAGAACTCGAGCAATTTCTCTTGAgAATTGCTCGAGTTCTTTCT 
pY1002-1  CCGGCCGTGAAGCTGGAGAAGGATTCAAGAGATCCTTCTCCAGCTTCACGGTTTTTTg
pY1002-2  AATTCAAAAAACCGTGAAGCTGGAGAAGGATCTCTTGAATCCTTCTCCAGCTTCACGG 
pY1003-1  CCGGGCTTCAAGAACATGTGTAATTCAAGAGATTACACATGTTCTTGAAGCTTTTTTg
pY1003-2  AATTCAAAAAAGCTTCAAGAACATGTGTAATCTCTTGAATTACACATGTTCTTGAAGC 
pY1004-1  CCGGGGGAGGAGCTAGGGAAAGATTCAAGAGATCTTTCCCTAGCTCCTCCCTTTTTTg
pY1004-2  AATTCAAAAAAGGGAGGAGCTAGGGAAAGATCTCTTGAATCTTTCCCTAGCTCCTCCC 
pYNC-GP-1  CcggTTCTCCGAACGTGTCACGTTTCAAGAGAACGTGACACGTTCGGAGAATTTTTg
pYNC-GP-2  aattcaaaaaTTCTCCGAACGTGTCACGTTCTCTTGAAACGTGACACGTTCGGAGAA

2. 表达载体的线性化
用Age I和EcoR I对表达载体进行双酶切,胶回收8.2kb的载体片段,酶切图谱如下:

                                                       
第一泳道:空质粒
第二泳道:1kb DNA ladder Marker:10 kb、8kb、6kb、5kb、4 kb、3.5kb、3kb、2.5kb、2kb、•1.5kb、1kb、750 bp、500 bp、250 bp
第三泳道:pLenti-U6-shRNA-CMV-EGFP-T2A-Puro载体Age I和EcoR I酶切后

3. 菌落PCR鉴定阳性克隆
用菌落PCR鉴定转化子,正向引物hU6-F2  TACGATACAAGGCTGTTAGAGAG 位于人U6启动子序列中,反向引物pY-SEQR  CTATTAATAACTAATGCATGGC位于CMV启动子的5端序列,阳性克隆得到331bp的片段,阴性对照得到586bp的片段。
pY1001菌落PCR鉴定图:
                                               

1. 阴性对照(空载体)
2. 阳性对照(pYNC-GP质粒)
3. DL2,000 DNA  Marker: 2 kb, 1 kb,750 bp,500 bp,250 bp,100 bp
4~11   挑取的8个转化子

pY1002菌落PCR鉴定图:
 
                                                  
1. 阴性对照(空载体)
2. 阳性对照(pYNC-GP质粒)
3. DL2,000 DNA  Marker: 2 kb, 1 kb,750 bp,500 bp,250 bp,100 bp
4~11   挑取的8个转化子

pY1003菌落PCR鉴定图:
                                                

 
1. 阴性对照(空载体)
2. 阳性对照(pYNC-GP质粒)
3. DL2,000 DNA  Marker: 2 kb, 1 kb,750 bp,500 bp,250 bp,100 bp
4~11   挑取的8个转化子

pY1004菌落PCR鉴定图:
       

                                                 

1. 阴性对照(空载体)
2. 阳性对照(pYNC-GP质粒)
3. DL2,000 DNA  Marker: 2 kb, 1 kb,750 bp,500 bp,250 bp,100 bp
4~11   挑取的8个转化子

4. 测序结果分析
pY1001测序结果
CCCCCCCATATCCAGCCTGTTGAGAGAATTGGATTAATTTGACTGTAAACACAAAGATATTAGTACAAAATACGTGACGTAGAAAGTAATAATTTCTTGGGTAGTTTGCAGTTTTAAAATTATGTTTTAAAATGGACTATCATATGCTTACCGTAACTTGAAAGTATTTCGATTTCTTGGCTTTATATATCTTGTGGAAAGGACGAAACACCGGAGAAAGAACTCGAGCAATTCTCAAGAGAAATTGCTCGAGTTCTTTCTTTTTTTGAATTCGGATCCATTAGGCGGCCGCGTGGATAACCGTATTACCGCCATGCATTAGTTATTAATAGTAATCAATTACGGGGTCATTAGTTCATAGCCCATATATGGAGTTCCGCGTTACATAACTTACGGTAAATGGCCCGCCTGGCTGACCGCCCAACGACCCCCGCCCATTGACGTCAATAATGACGTATGTTCCCATAGTAACGCCAATAGGGACTTTCCATTGACGTCAATGGGTGGAGTATTTACGGTAAACTGCCCACTTGGCAGTACATCAAGTGTATCATATGCCAAGTACGCCCCCTATTGACGTCAATGACGGTAAATGGCCCGCCTGGCATTATGCCCAGTACATGACCTTATGGGACTTTCCTACTTGGCAGTACATCTACGTATTAGTCATCGCTATTACCATGGTGATGCGGTTTTGGCAGTACATCAATGGGCGTGGATAGCGGTTTGACTCACGGGGATTTCCAAGTCTCCACCCCATTGACGTCAATGGGAGTTTGTTTTGGCACCAAAATCAACGGGACTTTCCAAAATGTCGTAACAACTCCGCCCCATTGACGCAATGGGCGGTAGGCGTGTACGGTGGGAGGTCTATATAAGCAGAGCTGGTTTAGTGAACCGTCAGATCCGCTAGCGCTACCGGACGCCACCATGGTGAGCATGGCGAGGAGCTGTTCACCGGGGTGGTGCCCATCCTGTCGAGCTGGACGCGACGTAACGCACAGTTCAGCGTGTCGGCGAGGGCGAGGCGATGCCACCTACCGCAGCTGACCTGAAGTCATCTGACACGCAGCTGCTGACTTGACCACCTTTGACACCTGACTACGCGTGATGTCAGCGTAACCGACCATGAGACGACTCTCTAGTCCATGCCAGACTTCTAGAGGACAATTCTTCGAAGATAGAAGCGG

pY1002测序结果(由于发夹结构,2个阳性克隆测序测序都中断)
CAAACAGCCTGTTAGAGAGAAATTGGATTAATTTGACTGTAAACACAAAGATATTAGTACAAAATACGTGACGTAGAAAGTAATAATTTCTTGGGTAGTTTGCAGTTTTAAAATTATGTTTTAAAATGGACTATCATATGCTTACCGTAACTTGAAAGTATTTCGATTTCTTGGCTTTATATATCTTGTGGAAAGGACGAAACACCGGCCGTGAAGCTG
Y1002-1 CCGGCCGTGAAGCTGGAGAAGGATTCAAGAGATCCTTCTCCAGCTTCACGGTTTTTTg

AATTAAGGGCCTGTTAGAGAGATAATTGGATTAATTTGACTGTAAACACAAAGATATTAGTACAAAATACGTGACGTAGAAAGTAATAATTTCTTGGGTAGTTTGCAGTTTTAAAATTATGTTTTAAAATGGACTATCATATGCTTACCGTAACTTGAAAGTATTTCGATTTCTTGGCTTTATATATCTTGTGGAAAGGACGAAACACCGGCCGTGAAGCT
Y1002-1 CCGGCCGTGAAGCTGGAGAAGGATTCAAGAGATCCTTCTCCAGCTTCACGGTTTTTTg

pY1003测序结果
CAACCGGGCTTGGTTAGAGAGACATTGGAATTAATTTGACTGTAAACACAAAGATATTAGTACAAAATACGTGACGTAcAAAGTAATAATTTCTTGGGTAGTTTGCAGTTTTAAAATTATGTTTTAAAATGGACTATCATATGCTTACCGTAACTTGAAAGTATTTCGATTTCTTGGCTTTATATATCTTGTGGAAAGGACGAAACACCGGGCTTCAAGAACATGTGTAATTCAAGAGATTACACATGTTCTTGAAGCTTTTTTGAATTCGGATCCATTAGGCGGCCGCGTGGATAACCGTATTACCGCCATGCATTAGTTATTAATAGTAATCAATTACGGGGTCATTAGTTCATAGCCCATATATGGAGTTCCGCGTTACATAACTTACGGTAAATGGCCCGCCTGGCTGACCGCCCAACGACCCCCGCCCATTGACGTCAATAATGACGTATGTTCCCATAGTAACGCCAATAGGGACTTTCCATTGACGTCAATGGGTGGAGTATTTACGGTAAACTGCCCACTTGGCAGTACATCAAGTGTATCATATGCCAAGTACGCCCCCTATTGACGTCAATGACGGTAAATGGCCCGCCTGGCATTATGCCCAGTACATGACCTTATGGGACTTTCCTACTTGGCAGTACATCTACGTATTAGTCATCGCTATTACCATGGTGATGCGGTTTTGGCAGTACATCAATGGGCGTGGATAGCGGTTTGACTCACGGGGATTTCCAAGTCTCCACCCCATTGACGTCAATGGGAGTTTGTTTTGGCACCAAAATCAACGGGACTTTCCAAAATGTCGTAACAACTCCGCCCCATTGACGCAAATGGGCGGTAGGCGTGTACGGTGGGAGGTCTATATAAGCAGAGCTGGTTTAGTGAACCGTCAGATCCGCTAGCGCTACGGGACGCCACCATGTGAGCAGGCGAGGAGCTGTTCACCGGGGTGGTGCCCATCTGTCGAGCTGACGCGACGTAACGCACAGTCAGCGTGTCGGCAGGCGAGGCGATGCACTACGCAGCTGACCTGAGTCATCTGCACACGCAGCTGCGTGCCTGTACTCGTGACCACCTGACCTACGCTGCATGCTCAGCGCTACCCGACCATGAAGCACCGACTCTCAGTCGCATGCCGAAGGCTCGTCCGGAGGCCAACTTCCAGGCACGGCATTCAGATCCCACCAGGTGAAGTTCCAGGGG

pY1004测序结果(由于发夹结构,阳性克隆测序测序中断)
CAAACCGGCCTGTTTAGAAGAGAAATTGGAATTAATTTGACTGTAAACACAAAGATATTAGTACAAAATACGTGACGTAGAAAGTAATAATTTCTTGGGTAGTTTGCAGTTTTAAAATTATGTTTTAAAATGGACTATCATATGCTTACCGTAACTTGAAAGTATTTCGATTTCTTGGCTTTATATATCTTGTGGAAAGGACGAAACACCGGGGGAGG
Y1004-1 CCGGGGGAGGAGCTAGGGAAAGATTCAAGAGATCTTTCCCTAGCTCCTCCCTTTTTTg

pYNC-GP测序结果
CTTTAATATACTTTGACTGTAAAAACAAAGATATTAGTACAAAATACGTGACGTAGAAAGTAATAATTTCTTGGGTAGTTTGCAGTTTTAAAATTATGTTTTAAAATGGACTATCATATGCTTACCGTAACTTGAAAGTATTTCGATTTCTTGGCTTTATATATCTTGTGGAAAGGACGAAACACCGGTTCTCCGAACGTGTCACGTTTCAAGAGAACGTGACACGTTCGGAGAATTTTTGAATTCGGATCCATTAGGCGGCCGCGTGGATAACCGTATTACCGCCATGCATTAGTTATTAATAGTAATCAATTACGGGGTCATTAGTTCATAGCCCATATATGGAGTTCCGCGTTACATAACTTACGGTAAATGGCCCGCCTGGCTGACCGCCCAACGACCCCCGCCCATTGACGTCAATAATGACGTATGTTCCCATAGTAACGCCAATAGGGACTTTCCATTGACGTCAATGGGTGGAGTATTTACGGTAAACTGCCCACTTGGCAGTACATCAAGTGTATCATATGCCAAGTACGCCCCCTATTGACGTCAATGACGGTAAATGGCCCGCCTGGCATTATGCCCAGTACATGACCTTATGGGACTTTCCTACTTGGCAGTACATCTACGTATTAGTCATCGCTATTACCATGGTGATGCGGTTTTGGCAGTACATCAATGGGCGTGGATAGCGGTTTGACTCACGGGGATTTCCAAGTCTCCACCCCATTGACGTCAATGGGAGTTTGTTTTGGCACCAAAATCAACGGGACTTTCCAAAATGTCGTAACAACTCCGCCCCATTGACGCAAATGGGCGGTAGGCGTGTACGGTGGGAGGTCTATATAAGCAGAGCTGGTTTAGTGAACCGTCAGATCCGCTAGCGCTACCGGGACGCCACCATGATGAGCAAGGGCGAGGAGCTGTTCACCGGGGTGGTGCCCATCCTGGTCGAGCTGGACGGCGACGTAAACGGCCACAAGTTCAAGCGTGTCCGGCGAGGGCGAGGGCGATGCCACTTACGGGCAGCTGAACCCTTGAAAGTTCATCTGGCCCACCGGCAAGCTTGCCGTGACCTTGACCAGCCATCGTAACCACCCTGACCTACGCGTGCATGCTTCGGCGCTAACCCGGACATGAGCAGCACGGACTTCTTCAAGTTCGGCATGGCCGAGCTACGTCAGAGCGACATCTCTTCAAGACGACGCACTACAGATCCGACGCAGAGTGTAAATCA
 

五、 和元参考文献
1. F.M.奥斯伯等著,马学军等译,精编分子生物学实验指南(第四版),科学出版社,P57~58
2. F.M.奥斯伯等著,马学军等译,精编分子生物学实验指南(第四版),科学出版社,P25~26

 

相关产品

UltraCruz™载体硝酸纤维素转膜,0.45μm,20cmx3m: sc-201698 丁香通标准抗体
品牌:santacruze  货号:sc-201698  价格:询价 
摘要:和元设计针对human Oct-4的shRNA干扰片段。通过分子生物学手段将该干扰片段构建入慢病毒载体(pLenti-U6-shRNA-CMV-EGFP-T2A- Puro)的U6启动子下游,该载体可以实现在干扰Oct-4基因的同时表达绿色荧光蛋白EGFP和puromycin抗性基因,前者便于观察载体工作状态,后者方便筛选Oct-4干扰的稳定细胞株。除了可以直接瞬时转染细胞用于Oct-4基因的干扰,该载体更可以包装慢病毒,用于稳定株的筛选以及在动物水平干扰Oct-4基因的表达。关键词:Oct-4,RNAi, shRNA, EGFP, puromycin, lentivirus vector一、 实验原理RNA干扰(RNA interference, RNAi)是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。由于使用RNAi技术可以特异性剔除或关闭特定基因的表达,所以该技术已被广泛用于探索 基因功能和传染性疾病及恶性肿瘤的基因治疗领域。shRNA作为RNA干扰的一种方法,是利用人源和鼠源的U6和H1等RNA聚合酶Ⅲ(pol Ⅲ)启动子转录短的干扰RNA (siRNA, 19-21个核苷酸的RNA 双链)的DNA分子。细胞内转录的shRNA被Dicer enzyme加工后掺入RNA诱导的沉默复合物(RNA-induced silencing complex, RISC),引导核酸酶降解靶RNA。shRNA表达载体的优点在于可以进行较长期研究——带有抗生素标记的载体可以在细胞中持续抑制靶基因的表达,持续数星期甚至更久。病毒载体也可用于 siRNA表达,其优势在于可以直接高效率感染细胞进行基因沉默的研究,避免由于质粒转染效率低而带来的种种不便,而且转染效果更加稳定。所选用的干扰载体pLenti-U6-shRNA-CMV-EGFP-T2A-Puro载体图谱如下。用Age I和EcoR I酶切切去U6启动子下游的ccdB毒性基因,插入待构建的shRNA序列。二、 实验目的和元构建带有EGFP荧光标记和puromycin抗性基因标记的human Oct-4干扰慢病毒载体。                                                
载体基本信息 出品公司: ZYbscience 载体名称: pLKO-DEST-EGFP 质粒类型: 慢病毒载体;RNAi载体;cDNA/shRNA gateway 高拷贝/低拷贝: 低拷贝 克隆方法: gateway 启动子: U6 载体大小: 8856 bp 5' 测序引物及序列: LKO.1 5' :GACTATCATATGCTTACCGT 3' 测序引物及序列: -- 载体标签: -- 载体抗性: 氨苄青霉素、氯霉素 筛选标记: Hygromycin 克隆菌株: 阳性筛选用DB3.1 ,阴性筛选用OmniMAX2-T1, 重组慢病毒载体的复制用Stbl3感受态细胞,以维持质粒的稳定性。 宿主细胞(系): 哺乳动物细胞 备注: 其它筛选标   产品目录号: ZY 32684 稳定性: 稳表达 组成型/诱导型: 组成型 病毒/非病毒: 慢病毒 载体质粒图谱和多克隆位点信息 载体简介 载体序列LOCUS pLKO-DEST-EGFP 8856 bp DNA SYNACCESSION KEYWORDS SOURCE ORGANISM other sequences; artificial sequences; vectors.FEATURES Location/Qualifiers source 1..8856 /organism="pLKO.DEST.EGFP" /mol_type="other DNA" misc_feature czybsciencezy
RNA干扰/RNAi/慢病毒  服务简介:RNA干扰(RNA interference,RNAi)是正常生物体内抑制特定基因表达的一种现象,当细胞中导入与内源性mRNA编码区同源的双链RNA(double stranded RNA,dsRNA)时,该mRNA发生降解而导致基因表达沉默的现象。外源dsRNA 进入细胞后产生的小分子干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)的反义链和多种核酸酶形成了沉默复合物(RNA-induced silencing complex,RISC),RISC具有结合和切割mRNA的作用而介导RNA干扰的过程。慢病毒具有感染范围广、持续表达等特点,主要用于难感染的细胞转染,如干细胞、免疫细胞(如DC细胞)和肿瘤细胞等。慢病毒的转染效率高和能持续表达的特点促进了RNAi的效果。根据客户提供的目的基因,针对该基因设计3个siRNA靶点,再将这些靶点构建到慢病毒载体,生产的病毒颗粒可以直接用于感染细胞或者动物实验。服务流程:服务优势:● 对分裂期细胞和非分裂期细胞均有感染作用;● 操作方便,安全性高;● 干扰稳定高效;● 实验周期短;● 多种载体可选。可供选择的病毒载体: 载体名称 载体特点 载体用途 pLenti-CMV-puro-U6-shRNA 带puromycin抗性 慢病毒干扰 pLenti-CMV-Hyg-U6-shRNA 带hygromycin抗性 慢病毒干扰 pLenti-CMV-Neo-U6-shRNA 带neomycin抗性 慢病毒干扰 pLenti-CMV-EGFP-U6-shRNA 带EGFP荧光蛋白 慢病毒干扰 pLenti-CMV-dsRed2-U6-shRNA 带红色荧光蛋白 慢病毒干扰 pLenti-Ubc-EGFP-U6-shRNA 带EGFP荧光蛋白 常用于神经细胞 pLenti-CMV-GFP-puro-U6-shRNA 带EGFP荧光蛋白和puro抗性 慢病
体外慢病毒是经二步纯化的慢病毒载体,适合绝大多数的体外实验。产品特点:1:VSVG包被,稳定性高,能够侵染绝大部分细胞;2:eGFP标记,容易观察感染效果;3:Puromycin抗性标记,用少量病毒感染即可筛选稳定株;4:量大,提供10ml病毒液,至少可以完成100次的24孔板感染实验;5:U6启动子表达shRNA,高效干扰目的基因。泰冷tuc-geneid

数据正在加载,请稍候...

电话: 021-31601005 联系人: 毛女士 (联系我时请说在丁香通看到的)

30秒填写信息,方便商家与您及时沟通

您未登录,马上登录 注册,即可保存询价历史
换一个



询价发送成功

和元生物技术(上海)股份有限公司 会在1个工作日内联系您!

马上登录注册,即可保存询价历史

你可能感兴趣的产品

生物学霸
帮助你升级成为学霸。
查看