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RNAi设计与载体构建服务
- 提供商:
汉恒生物
RNAi设计与载体构建服务
一、RNA干扰技术概述
RNA干扰(RNA interfering,RNAi)现象是由与靶基因序列同源的双链RNA引发的广泛存在于生物体内的序列特异性基因转录后的沉默过程。
由于RNAi具有高度的序列专一性,可以特异地将特定的基因沉默,从而获得基因基因功能丧失或基因表达量的降低。因此可以作为功能基因组学研究的一种强有力的工具。RNAi技术可以广泛应用到包括功能学,药物靶点筛选,细胞信号传导通路分析,疾病治疗等。
成功的RNAi实验设计是您实验成功的前提。汉恒生物专业的设计人员凭借多年的设计经验为您提供完整的RNAi实验设计服务和优化的siRNA,shRNA以及RNAi检测的探针和引物的设计服务。完善的实验设计,精准的靶标以及引物设计使您的实验节省人力和物力。
二、技术流程
1、基因的mRNA序列设计3条干扰片段(客户不提供干扰序列,可由汉恒设计);
2、把干扰片段设计成茎环结构克隆到含U6启动子或其他特定启动子的载体中,测序验证无误;
3、把空载和干扰质粒分别转染细胞;
4、用western blot检测干扰效率,筛选到干扰效率最高的片段可用于后续的研究。
三、客户需提供
1、客户提供干扰序列:需要提供RNA干扰的目的基因的名称(或Gene Bank号)、序列,并与我们共同讨论实验方案;
2、客户不提供干扰序列:由汉恒代为设计三条siRNA干扰序列。
四、报告内容及标准
1、siRNA/shRNA序列;
2、构建的载体以及测序报告;
3、荧光定量PCR检测报告/Western blot检测报告等;
4、具体实验方法、步骤、所用试剂、仪器及相关分析数据等。
五、收费标准及服务周期
收费标准及服务周期需根据客户提供的样品和具体要求不同而有所改变,详细请跟客服人员联系或参考所签订的合作合同。
六、质量保证
1、客户提供的干扰序列我们只负责构建及测序正确;
2、由汉恒代为设计的三条干扰序列,保证其中一条干扰效率不低于70%。

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文献和实验RNAi target selection rules : Targeted regions on the cDNA sequence of a targeted gene should be located 50-100 nt downstream of the start codon (ATG). Search for sequence motif AA(N19 )TT or NA(N21 ), or NAR(N17 )YNN, where N
,这种dsRNA可使内源相应的DNA序列甲基化,从而使启动子失去功能,使其下游基因沉默. 二、如何进行RNAi试验 (一)siRNA的设计 1. 在设计RNAi实验时,可以先在以下网站进行目标序列的筛选: http://www.genesil.com/business/products/order2.htm http://www.ambion.com/techlib/misc/siRNA_finder.html http
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