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外泌体(exosome),特指直径在40-100nm的盘状囊泡。其主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体,经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中。现已证实可以分泌外泌体的细胞有:肥大细胞、淋巴细胞、树突状细胞、肿瘤细胞、间充质干细胞等。
外泌体在免疫中抗原呈递、肿瘤的生长与迁移、组织损伤的修复等生理病理上起着重要的作用。同时,不同细胞分泌的外泌体具有不用的组成成分和功能,可作为疾病诊断的生物标志物。
一、服务内容:
(1)外泌体研究整体方案设计;
(2)外泌体提取/粒径测量/电镜检测;
(3)外泌体蛋白组/转录组。
二、实验流程:

三、相关研究(分离、鉴定、检测、示踪、共培养应用部分)

(a) Transmission electron microscopy demonstrates the presence of exosome vesicles (size bar = 200 nm). (b) TRPS analysis of exosomes isolations confirming the expected size range of 30 –150 nm in diameter.

(c) No difference was observed in the total number of exosomes particles secreted from 30KT and 30KTp53/KRAS/LKB1 cells. (d) Western blot confirmation of exosomes markers indicates the presence of HSP70 and CD63 in exosome lysates (EL), but only Calnexin is present in cell lysates (CL) indicating pure preparations.

(e) Time course internalisation of exosome uptake in 30KT cells of DiD-labelled exosomes. (f) Confocal microscopy demonstrating DiD-labelled exosome uptake in 30KT cells after 24 hrs.

(g) After 48 hrs at previously established IC50 values for 30KT cells, 30KT cells exposed to 30KTp53/KRAS/LKB1 exosomes are more resistant to gemcitabine and cisplatin gemcitabine combination therapy.
四、样本要求:
细胞、培养上清、血浆(全血、血清)等。
五、最终交付(根据具体项目):
(1)外泌体粒径检测报告;
(2)WB检测结果;
(3)q-PCR相关检测结果;
(4)电镜图片;
(5)NGS测序结题报告;
(6)蛋白组学结题报告。
六、实验周期:
根据项目情况具体确定。

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文献和实验)是一种常见的高死亡率胆道恶性肿瘤,占所有胆道肿瘤的 80%-95%。GBC 具有很强的侵袭和转移倾向,包括淋巴结、肝脏、血管和神经转移。由于 GBC 患者常被诊断为晚期,手术治疗效果普遍较差,因此迫切需要寻找新的有效的 GBC 分子靶点。异常血管生成是缺氧诱发恶性肿瘤的典型特征,其对 GBC 肿瘤的生长和侵袭至关重要,而 lncRNA 广泛参与 GBC 的恶性肿瘤。目前的相关研究中缺乏确凿的证据证实 lncRNA 与 GBC 中血管生成之间的相关性。 研究成果及意义:作者收集了 60 个新鲜切除
如何通过高纯度外泌体? 加快研究速度 外泌体相关研究越来越热,赛道也愈发精细,如何巧用外泌体,并让它服务于自己的课题呢?不论是 MSC EXOs 还是其他外泌体,高纯度提取一直是实验的前提。 本文分享 3 个影响外泌体结果准确性的因素,并给到大家详细的培养操作步骤参考,并总结操作过程中的 4 个常见 QA 带你提升外泌体纯度。 01 3 个因素影响外泌体结果准确性 1. 血清:常规细胞培养使用胎牛血清 FBS + 基础培养基培养,但是胎牛血清中富含外泌体
的法规问题。1 外泌体简介细胞外囊泡(extracellular vesicle,EV),根据大小、功能、来源的不同,可分为 3 种类型:外泌体、微囊泡和凋亡小体。外泌体是多囊泡体与细胞膜融合后分泌的直径为 30 ~ 150 nm 的 EV,微囊泡是细胞膜通过出芽直接脱落的直径为 100 ~ 1 000 nm 的 EV,凋亡小体是细胞在凋亡过程中释放的直径为 50 ~ 5 000 nm 的 EV。EV 是由大多数细胞通过多种机制形成的异质性细胞衍生囊泡。EV 通过多种体液(如血液、淋巴液、唾液
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