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N端测序服务-质谱分析
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北京百欧泰
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文献和实验上,然后被转化为光电信号记录成质谱图。根据质谱图的位置可进行定性和结构分析,而根据峰的强度可进行定量分析。 质谱分析法的特点与应用范围是: ( 1 )主要用以确定分子量。广泛用于有机物的分析,也可作为结构分析之用,因此是很好的定性分析的工具。 ( 2 )灵敏度高。目前用于有机物分析的质谱仪的灵敏度可达到 100pg 数量级。 ( 3 )操作简单,分析时间短,准确度高。 ( 4 )与色谱仪联用,对混合物试样可以同时进行分离
实验步骤 1. 胶内酶切随机选择重复性好,差异显著,无明显变形、拖尾,与周围蛋白点分离明确的蛋白点作为质谱分析对象,进行胶内酶解。 1) 从胶上切取蛋白质凝胶颗粒置入96孔培养板内,用去离子水清洗数次。 2) 加50 ul脱色液[30 mmol/L potassium ferricyanide和100 mmol/L sodium thiosulfate 1:1]在室温下震荡至凝胶中棕黄色褪尽,弃去溶液
Proteomics Primer 1. Proteomics 2. 2-D PAGE 3. Immobilised pH gradients (IPGs) 4. Mass spectrometry 5. Principles of mass spectrometry 6. Matrix assisted laser desorption/ionisation (MALDI) 7. Electrospray ionisation
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