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磁珠和寡核苷酸探针标记技术服务
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北京百欧泰
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文献和实验【资源】核酸杂交(Southern blot和Nouthern blot)疑惑解析-------送给新手们的礼物
原理:在变性条件下将待检的RNA样品进行琼脂糖凝胶电泳,继而按照同Southern Blot相同的原理进行转膜和用探针进行杂交检测。 用途:检测样品中是否含有基因的转录产物(mRNA)及其含量。 常见问题 Q1:标记方法有哪几种? A1:(1)切口平移法(2)随机引物法(3)末端标记法(4)单链DNA探针标记(5)寡核苷酸探针标记法 Q2:探针标记物的分类有几种? A2:(1)探针标记物有放射性核素与非放射性物质两种。放射性核素标记敏感性高,可检测pg水平的核酸,但因不易长期
商可查看免疫学服务 、 蛋白相关服务 、 生物芯片服务 、 实验动物服务 、 细胞生物学服务 、 干细胞技术服务 、 寡核苷酸合成服务 、 整体实验外包服务 、 新药研发外包服务 、 微生物学服务 等。
随机引物法探针标记 随机引物法的原理是使被称为随机引物(random primer)的长6个核苷酸的寡核苷酸片段与单链DNA或变性的双链DNA随机互补结合(退火),以提供3, 羟基端,在无5, →3, 外切酶活性的DNA聚合酶大片段(如Klenow片段)作用下,在引物的3, 羟基末端逐个加上核苷酸直至下一个引物。当反应液中含有标记的核苷酸时,即形成标记的DNA探针。6个核苷酸混合物出现所有可能结合序列,引物与模板的结合以一种随机的方式发生,标记均匀跨越DNA全长。当以RNA
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