基因敲除

基因敲除 服务编号：BIOFW061 服务简介 基因组编辑技术是一种可以在基因组水平上对DNA序列进行改造的遗传操作技术。这种技术的原理是构建一个人工内切酶，在预定的基因组位置切断DNA，切断的DNA在被细胞内的DNA修复系统修复过程中会产生突变，从而达到定点改造基因组的目的。 CRISPR是一种来源于细菌免疫系统的基因编辑技术，能识别靶细胞DNA片段中靶点的核苷酸序列，利用核酸内切酶蛋白对DNA靶点序列进行切割，产生双链DNA断裂，断裂将在体内被细胞修复机制修复，其中，非同源末端连接NHEJ这种修复将产生短的核酸插入或删除，其带来的基因移码突变，将导致提前出现终止密码子，从而完成对靶细胞DNA目的基因片段的敲除。Cas9/gRNA基因鼓除体系通过一小段gRNA识别特异DNA序列，对识别位点附近的DNA切割，从而实现基因的定点敲除或敲入。由于特异基因识别由一小段RNA即gRNA完成，而系统中的蛋白组成部分保持不变，因此可以非常方便的采用不同的人工合成或表达的gRNA与Cas9蛋白配合，实现对不同基因的敲除。 百欧泰建立了一套成熟稳定的基因干扰表达的实验体系，可针对多种不同细胞（包括难转染细胞）为您提供基因敲除细胞株的构建服务。具备成熟的细胞实验服务平台，服务内容丰富详细。同时还可为客户提供包括过表达、沉默稳转细胞系构建等多种技术服务。 服务步骤 1 稳转细胞株筛选 2 载体构建 3 病毒包装 4 细胞转染 5 稳定转染细胞株筛选 6 交付（可商榷） 实验报告 构建病毒载体 目的基因表达检测报告 基因敲除细胞株 细胞选择 1 不能有支原体污染 2 选择有成功案例的细胞株 3 细胞容易增殖、克隆形成率高、没有多基因的问题、染色体不要突变太严重 4 肿瘤细胞系 应用范围 1 研究基因的功能及表达调控机制 2 寻找合适药物作用靶点