过氧化氢诱导动物模型

过氧化氢诱导动物模型造模方法

 

2.1、原理：根据黑色素不稳定， 易受强氧化剂过氧化氢破坏的特性， 破坏皮肤黑色素， 使皮肤脱色，建立白dian风模型。

2.2、方法：体重 200 g 左右， 花黑色豚鼠， 雌雄各半， 背部脱毛， 脱毛面积约 4 cm × 4 cm。脱毛后用生理盐水清洗脱毛局部， 局部脱毛区均无损伤。在脱毛区涂 5% 过氧化qing溶液 1 mL， 每天2 次， 上午和下午各 1 次 ( 每次 0. 5 mL， 每次先涂0. 25 mL，10 min后再同量涂 1 次) ， 连续 50 d， 可制备豚鼠白dian风模型。在此期间， 各组豚鼠每 3 d 脱毛 1 次。本模型可持续 50 -60 d。

3、莫诺苯宗乳膏脱色法制备小鼠白dian风模型

3.1、原理：通过 TYR与活性氧自由基( ROS) 的相互作用， 引起系统性的自身免疫反应， 并作用于黑素细胞， 从而导致色素脱失， 与职业暴露性的白dian风无明显差异。

3.2、方法 ：C57BL /6 小鼠， 雄性 ( 雌性) ， 体重20 g左右， 脱去背部黑色毛， 脱毛面积约 2 cm ×2 cm， 脱毛后用生理盐水清洗脱毛局部， 局部脱毛区均无损伤。每天用刮勺稍用力涂抹 40% 莫诺苯宗乳膏 50 mg， 每天 1 次; 连续 50 d， 可制备小鼠白dian风模型。本模型可持续 50 -65 d。

过氧化氢诱导动物模型建模指标

 

表观指标：色素多少、色素面积大小、干燥脱屑情况等为白dian风的主要表观指标， 可对这些表观指标进行量化积分或半量化分级。白dian风动物模型制备成功后， 病变局部无色素， 皮肤呈苍白或白斑状， 干燥伴明显脱屑等。表观指标是临床白dian风的主要诊断依据， 也应是模型判定的依据， 权重系数 0. 5。

病理指标：局部组织病理指标是高倍镜下观察含黑色素毛囊数、含黑素颗粒的细胞个数 。白dian风动物模型制备成功后局部组织形态观察， 可见棘层明显增厚， 角质层增生明显; 按 Lillie 硫酸ya铁染色法黑色素染色试剂盒说明书进行黑色素染色， 黑色素毛囊数显著降低; 高倍镜下随意观察基底细胞和棘层细胞颗粒， 可见有黑素颗粒的细胞个数显著减少。病理指标是白dian风动物模型病理变化的直接依据， 为直接相关指标， 权重系数 0. 3。

生化指标：白dian风的发生与体内血清 TYR性密切相关， 与胆jian酯酶 ( CHE) ， 单 胺氧化酶( MAO) 活性， 丙二醛( MDA) ， 白细胞介素-6 ( IL-6)及肿瘤坏死因子-α( TNF-α) 含量等有一定关系。白dian风动物模型制备成功后， TYR 活性明显下降，CHE 和 MAO 活性升高， MDA， IL-6 和 TNF-α 的含量均增加。生化指标是白dian风动物模型发生、发展、康复过程的机体反映， 有一定价值， 但特异性不高， 权重系数 0.2。