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- 武汉金开瑞生物工程有限公司
- JKR23006P
- 中国
- 2026年10月19日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
6T
- 英文名：
DNA pull-down Kit for plant
- 保质期：
参照shuomingshu
- 供应商：
武汉金开瑞生物工程有限公司
- 保存条件：
参照shuomingshu
- 规格：
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技术简介
DNA pull down技术是体外研究DNA 与蛋白质互作的有力工具。该技术针对目标区域 设计特异性DNA 探针并经过脱硫生物素标记，脱硫生物素探针可以和偶联在磁珠上的 链霉亲和素亲和结合(Wang,Yu et al.2004)。然后，细胞提取物与磁珠-DNA 探针孵育，作用蛋白质分子可以和DNA 探针特异性结合；经过洗涤可以将非特异性结合蛋白质去 除；最后，经洗脱液洗脱，得到目的DNA 探针-蛋白质复合物，再经过Western Blot或质谱(MS) 鉴定蛋白质类型。其原理图如1.1:
实验流程
试剂盒组分、操作步骤等更多细节请查看zuixinban说明书
常见问题
Q:通过pull-down后银染验证发现，没有想要的目的条带?
1)有可能是样品被蛋白酶降解，对应的策略是需要添加蛋白酶抑制剂，所有操作保持 4℃以下冰上操作并防止冻融；
2)有可能是加入生物素标记DNA 量不足，可以增加生 物素标记DNA 量；
3)裂解液盐碱度太高，需用低盐碱度的裂解液；
4)加入细胞裂解液 不够，可以增加细胞裂解量。
武汉金开瑞生物工程有限公司是一家专业致力于为全球制药企业、诊断试剂企业、科研试剂研发企业、高校和科研院所以及大型医院提供蛋白及相关研究技术服务的高新技术企业。金开瑞极其注重平台技术提升，现已有多项自主知识产权和软件著作权专利，并已通过ISO9001质量管理体系认证，2018获批“千企万人”支持计划。公司以“细胞外囊泡”研究中心、基础生物医学实验中心、蛋白抗体中心和分子生物学中心为依托，提供核酸和蛋白的整体研究方案，与众多科研单位携手开展了大量的探索项目。截止到目前，已支持客户发表科研论文达1000+篇，累计影响因子6000+。
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文献和实验的 DNA 同时得到高质量的 DNA，Zymo Research 的试剂盒应用有不错的效果。重测序要求基因组 DNA 量相对少，可采用试剂盒 QIAGEN DNeasy Plant Mini Kit，成本相对低的有天根的 Plant Genomic DNA Kit。 2. 植物总 RNA 主要应用于植物的转录组、表达谱和小 RNA 等测序。植物总 RNA 的提取同样可采用 CTAB 方法, 配方和步骤如下： CTAB 裂解液配方：100 mmol/L Tris-HCl(pH
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三篇顶刊论文，同一个技术选择——BiFC如何破解植物蛋白互作难题？
相互作用，它们会在空间上相互靠近 ●这种靠近使得原本分离的荧光蛋白两个片段重新组装成完整的、具有荧光活性的蛋白 ●通过荧光显微镜观察是否出现荧光信号，即可判断蛋白间是否存在相互作用 常见荧光蛋白选择： ➤Venus/YFP：最常用的BiFC荧光蛋白，荧光强且背景敏感度低 ➤CFP/ECFP：青色荧光蛋白，适用于多色BiFC或与YFP组合进行FRET分析 ➤mCherry/mRFP：红色荧光蛋白，穿透性强，适用于深层组织成像 实战案例：BIFC技术如何验证植物蛋白互作?
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