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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
6T
- 英文名:
Chromatin Immunoprecipitation (ChIP)Kit
- 保质期:
参照shuomingshu
- 供应商:
武汉金开瑞生物工程有限公司
- 保存条件:
参照shuomingshu
- 规格:
具体报价请联系
实验原理
染色体免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP)是用来研究蛋白质与DNA是否在体内存在相互作用,这项技术帮助研究者判断在细胞核中基因组的某一特定位置会出现何种组蛋白修饰。利用抗体抗原特异性结合,将与目的蛋白相结合的DNA片段沉淀下来,能够真实地反映结合在DNA序列上的调控蛋白。

实验流程

试剂盒组分、操作步骤等更多细节请查看zuixinban说明书
常见问题
Q1:怎么探索超声条件
接触式超声仪:取1.5mL/2mL EP管,加入1.2mL液体,将探头置于EP管中心,液面下约一半的位置, 设置超声时间为10S,逐渐增加调整功率,直至开始起泡,此时功率为超声最大功率。在此基础上设置三个不同的功率梯度和时间梯度进行探索。非接触式:可按厂家推荐进行探索。
Q2:超声后片段不符合要求
1.有符合要求的片段也有比较集中无法超声的大片段,可能是交联温度过高,交联时始终保持温度低 于25℃,尤其是夏天温度较⾼可将试剂和样本放置空调出风口一段时间再进行操作。
2.片段很集中且小200bp,超声功率和时间不合适,需要做预实验探索最佳超声条件。
Q3:IP和IgG样本Ct值没有差异
多方面原因造成:
1、抗体没有富集到DNA,可更换抗体尝试
2、IgG背景过高,可增加洗涤次数或减少免疫沉淀步骤DNA投入量。
3、结合位点预测错误,需重新设计引物。
Q4:溶解曲线异常
出现非特异扩增或有引物二聚体等情况,需重新设计引物。
Q5:样本DNA浓度很低,低于10ng/μL
1.样本投入量过少:考虑增加样本初始投入量,尤其是肌肉,心脏等。
2.裂解不完全:过度交联的样本或组织研磨不充分。
如遇难裂解的细菌样本可在加入Lysis Buffer后-80℃反复冻融3次。
金开瑞-提供核酸和蛋白的整体研究方案:
武汉金开瑞生物工程有限公司是一家专业致力于为全球制药企业、诊断试剂企业、科研试剂研发企业、高校和科研院所以及大型医院提供蛋白及相关研究技术服务的高新技术企业。金开瑞极其注重平台技术提升,现已有多项自主知识产权和软件著作权专利,并已通过ISO9001质量管理体系认证,2018获批“千企万人”支持计划。公司以“细胞外囊泡”研究中心、基础生物医学实验中心、蛋白抗体中心和分子生物学中心为依托,提供核酸和蛋白的整体研究方案,与众多科研单位携手开展了大量的探索项目。截止到目前,已支持客户发表科研论文达1000+篇,累计影响因子6000+。
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文献和实验Chromatin Immunoprecipitation (ChIP)Kit
Chromatin Immunoprecipitation (ChIP)
INTRODUCTION Chromatin immunoprecipitation (ChIP) is an invaluable method for studying interactions between specific proteins or modified forms of proteins and a genomic DNA region. ChIP can be used to determine whether a transcription
were washed with PBS and resuspended in ChIP lysis buffer (1% SDS, 10mM EDTA, 50 mM Tris-HCl pH8.0) add protease inhibitors (inhibitors: 1mM PMSF, 1microgram/ml aprotinin and 1microgram/ml pepstatin A).. After incubated 10 minutes on ice, cells were sonicated
Yeast Chromatin Immunoprecipitation (ChIP)
Yeast Chromatin Immunoprecipitation (ChIP)Hahn LabJuly 2003Chromatin IP MethodDay 11.Start 5 ml o/n cultures of strains to be testedDay 21.Inoculate 50 ml of the desired media with a volume of a saturated o/n culture and grow o/n with shaking at 200
技术资料





