兔免疫组化检测试剂盒 IHC检测试剂盒(IHC kit)

产品信息

产品名称	产品编号	规格	价格（元）
Immunohischemistry Kit for Rabbit Primary Antibody 兔免疫组化（IHC）检测试剂盒	36312ES75	300 T	1186

产品描述
翌圣IHC Kit for Rabbit Primary Antibody可用于检测以兔单克隆或多克隆抗体为一抗的免疫组化实验，检测原理基于高特异性高亲和力的链霉亲和素-生物素结合：已固定或培养细胞的抗原与一抗形成抗原抗体复合物，生物素化二抗特异性结合上述复合物，经辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素特异性识别生物素（即抗原所在位置），最后经辣根过氧化物酶底物显色即可检测相应抗原。
本品可适用于多种类型样本，如石蜡包埋切片、冰冻切片、培养细胞涂片及血液标本等。

产品组分

组分编号	组分名称	产品编号/规格
36312-A	Normal goat serum for IHC 封闭液	7.5 mL x 2
36312-B	Biotin-conjugated Anti-Rabbit IgG 生物素标记抗兔二抗	7.5 mL x 2
36312-C	HRP-conjugated Streptavidin HRP 标记链霉亲和素	7.5 mL x 2
36312-D	20×DAB Substrate Buffer 20×DAB底物缓冲液	800 µL
36312-E	1×DAB Stock Solution 1×DAB浓缩液	16 mL

运输和保存方法
冰袋运输。4℃保存，有效期1年。勿冰冻！

注意事项
1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2）DAB是一潜在致癌物，使用时请注意自我防护。
3）检测样本时需同时做阴性对照和阳性对照。

准备试剂
1）二甲苯、乙醇、甲醇
2）去离子水
3）30%过氧化氢溶液
4）1×PBS，PH 7.4
5）苏木素染色液（Cat#60502）
6）封片剂（Cat#36313）

使用方法
1. 样品准备
染色前用PBS浸泡组织或细胞涂片10 min。石蜡切片于室温下用二甲苯常规脱蜡、入水、抗原修复。
【注】从此步骤起，严禁标本或组织切片干燥。
2. 染色（以石蜡切片为例）
1）将处理好的石蜡切片放入3% H₂O₂-甲醇溶液中浸泡10 min，以消除内源性过氧化氢酶的作用。
2）清洗：PBS清洗3次，2 min/次。
3）封闭：加一滴封闭液于组织切片上（需完全覆盖待检组织）孵育10 min。
4）倒掉或吸干液体（不要冲洗）。
5）一抗孵育：每张切片加2滴（100 µL）或适量一抗（需完全覆盖待检组织），湿盒内孵育30-60 min。
6）清洗：PBS清洗3次，2 min/次。
7）二抗孵育：每张切片加一滴生物素标记抗兔二抗（需完全覆盖待检组织），孵育10 min。
8）清洗：PBS清洗3次，2 min/次。
9）酶孵育：每张切片加一滴HRP标记链霉亲和素（需完全覆盖待检组织），孵育10 min。
10）清洗：PBS清洗3次，2 min/次。
11）制备DAB显色液。
按照底物缓冲液和浓缩液1:20的比例进行配制显色液，以1张切片为例，分别吸取试剂D、E溶液2.5 µL和50 µL充分混匀即可
【注】① DAB显色液需现配现用，避光放置，且在30 min内使用。
② 可根据需要一次染多张切片，各种试剂量按照上述比例放大即可。
12）显色：向切片上滴加一滴上述DAB显色液，室温显色2-5 min（此步可在显微镜下控制显色程度）。
13）自来水充分冲洗。
14）用合适复染剂复染，盐酸酒精分化。
15）继续后续脱水、透明、封片、镜检。
3 . 结果判定
阳性结果处显处染棕黄或棕褐色。
HB190522