- ￥1460
- 万类生物
- 中国
- WLA112a
- 2026年01月04日
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4℃及-20℃
- 规格：
20T
万类生物试剂促销：试剂盒8折优惠，免疫共沉淀（Co-IP）试剂盒-20T 原价1460元，现价1168元。
产品名称：免疫共沉淀（Co-IP）试剂盒
产品概述：免疫共沉淀（co-immunoprecipitation，Co-IP）是研究蛋白质间相互作用的一种常用方法,基本原理是以细胞内源性靶蛋白为诱饵，将靶蛋白抗体与细胞总蛋白进行共孵育，促进免疫复合物的形成；随后加入能够与抗体Fc段结合的prorein A+G，形成“结合蛋白-靶蛋白-靶蛋白抗体-protein A+G小珠”复合物，纯化该复合物后凝胶电泳分离蛋白，应用Western blot或者质谱技术鉴定靶蛋白的结合蛋白。
包装信息：
保存日期：本试剂盒自订购之日起一年内有效。
注意事项：
1. 裂解细胞时，为防止蛋白降解，所有的操作尽量在冰上进行。
2. 测定蛋白浓度时，样品中若含有EDTA、EGTA、DTT、硫酸铵和脂类会影响检测结果。
3. 要确保抗体的特异性，即在不表达抗原的细胞溶解物中添加抗体后不会引起共沉淀，确保共沉淀的蛋白是由所加入的抗体沉淀得到的，而并非外源非特异蛋白，单克隆抗体的使用有助于避免污染的发生。
4. Protein A+G离心时，离心力不易过高，会损坏Protein A+G，离心力在3000-5000×g即可。
操作流程：
1. 除去细胞培养基，用预冷的PBS（需自备）洗涤细胞两次。
2. 加入预冷的裂解液(见表1)，冰育5min。
3. 用预冷的细胞刮将细胞从培养皿或培养瓶上刮下，把悬液转到1.5ml EP管中，缓慢晃动10min。
4. 4℃，14000×g离心15min，将上清转移至新的离心管中。
5. 准备Protein A+G，用1ml PBS清洗三次（3000×g离心1min）后保存备用，此步骤可提前准备。
③ 加适当体积样品到96孔板的样品孔中，再用PBS溶液补足至20μl。
④ 向各孔加入200μl工作液，37℃放置30min(也可室温放置2h)。
⑤ 用酶标仪测定A562，根据标准曲线计算出蛋白浓度。
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文献和实验—— co-IP 检测 Hsp90 与 Cdc37 结合情况1、实验材料SKBR3 细胞，PMSF（Amresco，cat:329-98-6），cocktail（上海晶莱生物），脱脂奶粉（cat:66196131T），β-actin（上海晶莱生物）。Anti-Hsp90(santa,cat:sc-69703)、Anti-Cdc37(santa,cat:sc-13129)、Protein A+G agrose(Beyotime)，细胞刮，4 度离心机（eppendorf，centrifuge
一、原理：免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是：当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质－蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X，那么与X在体内结合的蛋白质Y也能沉淀下来。目前多用精制的prorein A预先结合固化在argarose的beads上，使之与含有抗原的溶液及抗体反应后，beads
Co-IP 免疫共沉淀实验对照设置和 trouble shooting
最近在不同技术论坛上溜达加上客户的来电咨询，发现 Co-IP 免疫共沉淀的实验小伙伴做得并不是很顺利，遇到的问题也是千奇百怪，有什么条带也没有检测到的，有泳道一片漆黑的，有出了条带但位置大小还不对，真是让小伙伴们伤透了脑筋，万变不离其踪，做实验之前我们先系统地的了解一下实验各个环节的一些基本概念和注意事项，以及如何设置完整的对照以便出问题时快速分析原因。免疫共沉淀实验原理介绍： 免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation），简称 Co-IP，其原理是当细胞在非
