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- Western Blot是一种用于分离和鉴定蛋白质的技术
- 全国
- 2025年10月09日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商：
中科圣安
- 服务名称：
WB蛋白质免疫印迹
- 规格：
一张膜
Western Blot是一种用于分离和鉴定蛋白质的技术。它利用 SDS-凝胶电泳 (SDS-PAGE) 来分离指定样品中包含的各种蛋白质，然后将分离的蛋白质转移到硝酸纤维素或 PVDF 膜上，再将膜与对应目标蛋白质的特异抗体一起孵育。在洗膜过程中，未结合的抗体被洗掉，只留下与目标蛋白质结合的抗体，最后通过显影胶片或荧光扫描来检测结合的抗体。由于抗体仅与目标蛋白质结合，因此看到的带一般就是目的条带，条带的粗细对应于蛋白质量。通过分析特定反应的位置和强度，可以获得目标蛋白在给定细胞或组织匀浆中的表达信息。 由于凝胶电泳的高分辨率和免疫的强特异性和高灵敏度，Western印迹分析可检测低至1ng的靶蛋白。该方法广泛应用于分子生物学、生物化学、免疫遗传学等分子生物学领域。
蛋白质免疫印迹（Western Blot）技术服务流程：
①细胞或者组织总蛋白提取；
②蛋白质定量；
③SDS-PAGE凝胶电泳；
④蛋白质转膜（硝酸纤维素或 PVDF）；
⑤膜的封闭；
⑥一抗、二抗孵育；
⑦显影检测；
⑧数据分析，交付结果。
蛋白质免疫印迹（Western Blot）技术服务优势：
①团队经验丰富；
②交付周期短，提供原始图片以及试验记录，保证数据真实可靠；
③本公司所用的电泳设备、一抗、二抗、显影液和显影仪都是进口的，确保实验的高灵敏度以及高特异性；
④可以检测pg级别的低浓度蛋白。
技术要求
①提供的细胞或者组织样品尽可能新鲜，组织块大于100 mg；细胞大于6×106；
②说明样品上样顺序信息；
③客户需要自备一抗，或者由本公司代购一抗；
④收到样品后7~10个工作日内向客户交付实验数据；
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杂交膜的选择是决定 Western blot成败的重要环节。应根据杂交方案、被转 移蛋白的特性以及分子大小等因素，选择合适材质、孔径和规格的杂交膜。用于Western blot的膜主要有两种：硝酸纤维素膜(NC) 和 PVDF 膜。NC 膜是蛋白印迹实验的标准固相支持物，在低离子转移缓冲液的环境下，大多数带负电荷的蛋白质会与膜发生疏水作用而高亲和力的结合在一起， 但在非离子型的去污剂作用 下，结合的蛋白还可以被洗脱下来。根据被转移的蛋白分子量大小，选择不同孔 径的 NC 膜。因为随着膜孔径的不断
WB 作为传统的实验技术，在实验室中得到了广泛的应用。 讲座从 WB 的基础原理、实验流程及常见问题和解决方法等方面对此项技术进行全面的介绍，结合具体实验案例，深入浅出的对 WB 技术进行解析，无论实验新手还是富有经验的操作者，都可以从讲座中获得所需的知识，用于获得更为完美的 WB 实验结果。
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