RT-PCR、QPCR、Real-time PCR、real-time RT-PCR你真的区分的开吗?
多少同学能将 RT-PCR、Realtime-PCR、QPCR区分清楚?有多少同学还在犯晕?今儿这贴,师兄就带你区分区分,人家破除迷信,咱就来个破除 PCR 迷雾。什么是 RT-PCR?逆转录PCR(reverse transcription PCR)或者称反转录PCR(reverse transcription-PCR, RT-PCR),是聚合酶链式反应(PCR)的一种广泛应用的变形。在RT-PCR中,一条RNA链被逆转录成为互补DNA,再以此为模板通 ...
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手把手教你设计引物(图文并茂)
不知不觉几年下来自己也快毕业了,感谢丁香园这些年来的帮助。没有什么可回报的东西,就发个帖教教新人如何设计引物吧,尽量做到手把手的教,图文并茂。引物设计的帖子不少,以前很多战友会推荐Oligo、PrimerPremier、DNA man等等软件。这些软件设计完最后还是要去BLAST比对下,所以我教大家一种易懂实用的在线设计方法,觉得好的话请投个票。就以人的PTEN基因为例,首先你要找到他的基因序列,如果你要用的是cD ...
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Transwell实验全面总结
这里想明确两个概念,一个是Transwell,另一个是肿瘤细胞侵袭模型。1.Transwelltrans-这个词根有转移、转运、穿过等意思,well有小室的意思,可以从字面上理解,这是一类有通透性的杯状的装置,根据Corning公司的Transwell说明书中的介绍,可以认为这是一种膜滤器(Membrane filters),也可认为是一种有通透性的支架(permeable supports)。 ...
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PCR技术原理、实验步骤和应用
一、实验目的1.掌握聚合酶链式反应的原理。2. 掌握移液枪和PCR仪的基本操作技术。二、实验原理PCR技术,即聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)是由美国PE Cetus公司的Kary Mullis在1983年(1993年获诺贝尔化学奖)建立的。这项技术可在试管内的经数小时反应就将特定的DNA片段扩增数百万倍,这种迅速获取大量单一核酸片段的技术在分子 ...
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