PCR-SSP分析实验原理和步骤
PCR 序列特异性引物(sequence specific primerSSP)分析法是使用能够特异识别特定等位基因的引物通过PCR 扩增检测序列多态性的方法,也称作等位基因特异性引物PCR 法。本实验是应用PCR-SSP 法检测MN 基因型。根据决定某等位基因的碱基性质,设计3′端第一个碱基分别与各等位基因的特异性碱基相匹配的序列特异性引物,在PCR 反应过程中,只有引物3&prim ...
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PCR/SSP技术
一、血清学分型技术1. HLA-Ⅰ类抗原的检测HLA-A、B、C抗原型别鉴定均借助微量淋巴细胞毒试验(microlymphocytotoxicitytest)或称补体依赖的细胞毒试验(complementdependentcytotoxicitytest)。原理为取已知HLA抗血清加入待测外周血淋巴细胞,作用后加入免补体,充分作用后加入染料,在倒置显微镜下判断结果,着染的细胞为死 ...
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PCR-SSP结果分析
简介采用SSP进行PCR扩增后,相应的PCR产物是否出现,是HLA分型结果的判断的依据,相应SSP扩增产物出现,表示基因组中存在与特异性引物(即SSP)互补结合的DNA序列,即样本为该SSP结合的HLA基因阳性。当某种SSP引物的扩增管中未出现相应的PCR产物时,应注意观察内参照引物是否出现PCR产物。如果该扩增管的内参照引物出现PCR产物,而无相应SSP扩增产物,说明样本为该SSP特异性扩增 ...
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PCR-SSP检测人类白细胞抗原(HLA)B27表达水平的研究
一、摘要目的利用聚合酶链反应(PCR)进行HLA-B27的测定,探讨HLA-B27水平,正确评价HLA-B27的临床意义方法应用PCR技术进行人外周血白细胞的HLA-B27检测。结果采用该方法对各组病人外周血HLA-B27测定。结果表明:正常对照组,健康人70例,B27阳性3例,阳性率4.2%,48例原因不明的腰腿痛病人中B27阳性11例,阳性率22.8%,本组临床拟诊强直性脊柱炎(AS)患者 ...
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