免疫PCR系列一-基本原理
免疫PCR(immuno polymerase chain reaction,IM-PCR)是1992年Sano建立的一种检测微量抗原的高灵敏度技术。其本质是一种以PCR扩增一段DNA报告分子代替酶反应来放大抗原抗体结合率的一种改良型ELISA。
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最新的GoTaq®两步法RT-qPCR系统
Madison, WI USA. (2010年8月10日) Promega新的GoTaq® 2-Step RT-qPCR System(GoTaq®两步法RT-qPCR系统)使得研究者可以检测到低水平表达的目的基因,甚至可以检测难以扩增的样品。两步法系统提高了灵敏度,扩展了RNA定量的动态范围,提供了一个强劲的基因表达分析工具。
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【求助】miRNA mimic qRT-PCR检测可以提高多少倍?
nvonne 我购买的miRNA mimic 带FAM标记,本打算用流式检测转染效率,但发现荧光信号很弱,转染后采用定量PCR检测miRNA的表达变化,相对定量分析,发现mimic组比NC阴性对照组的miRNA表达量提高了100多倍,这虽然表明转染mimic成功,但总感觉这么高的变化有点太离谱了是不是?也没查到相关文献,谁能给我一些参考?非常感谢zhujoker 顺转就是这么高,我的也是这样,有的能够上调1000倍nvonne ...
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real time PCRTaqman探针设计、实时多重PCR探针的选择、引物的设计及评价
一、实时荧光Taqman 探针设计总原则:探针选择要保守,引物选择要保守,因此必须找一段100-200bp相对要保守的片段来设计引物与探针。即real-time PCR的扩增片段是50bp----150bp。当找不到150bp的保守片段时,必须确保探针的片段是保守的。在设计探针和引物时,要同时考虑在两条链上设计引物与探针。但要注意的是:在那条链上设计探针时,就应靠近在同一条链上设计的引物(即上游 ...
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