CPT2下调通过TNFα/NF-κB通路促进胆管癌的增殖和迁移

背景：肉碱棕榈酰转移酶II（CPT2）是参与脂肪酸氧化的重要调节酶；它与结直肠癌和卵巢癌的预后和进展相关，但其在胆管癌（CCA）中的表达和作用研究较少。本研究旨在探讨CPT2在CCA中的作用和分子机制，并确定CPT2表达与CCA患者预后之间的潜在关系。方法：采用生物信息学分析评估CPT2在CCA和其他癌症中的表达。通过单因素和多因素Cox回归分析确定CCA的独立预后因素。使用列线图预测CCA 1年、3年和5年生存率。Kaplan-Meier曲线探讨CPT2表达与CCA生存率之间的相关性。我们使用时间依赖性受试者工作特征（ROC）曲线评估CPT2的预测效率。此外，通过基因集富集分析（GSEA）分析CPT2在CCA中的潜在机制。通过实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）和蛋白质印迹法验证CPT2在CCA外周血、组织和细胞系中的表达。使用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）、细胞周期、凋亡和Transwell实验评估CPT2对CCA细胞的影响。最后，通过蛋白质印迹法验证CPT2对TNFα/NF-κB通路的调控。结果：CPT2表达在许多癌症中下调，包括CCA。Cox回归分析显示CPT2表达和临床分期可作为CCA的独立预后因素。列线图表明，CPT2表达越低、临床分期越高，CCA生存概率越低。Kaplan-Meier曲线显示CPT2低表达与CCA预后不良相关。时间依赖性ROC曲线证明了CPT2的预测能力[1年、3年、5年曲线下面积（AUC）=0.933、0.61、0.612]。功能上，CPT2过表达抑制CCA细胞增殖，下调CDK4/6表达使CCA细胞阻滞于G1期，通过上调BAX表达、cleaved-caspase-3表达和下调Bcl2表达诱导凋亡，并通过抑制上皮-间质转化（EMT）减少迁移和侵袭。敲低CPT2则产生相反结果。机制上，CPT2过表达可降低TNFα和磷酸化p65（p-p65；Ser536）表达，抑制NF-κB通路激活。CPT2敲低则产生相反结果。结论：CPT2是CCA的潜在预后标志物，是抑制CCA恶性进展的肿瘤抑制基因，因此是潜在的治疗靶点。