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猪肺原代巨噬细胞适合什么培养基,1640还是高糖
bamboopiggy
巨噬细胞一般算悬浮细胞,适合用1640养
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问
细胞增殖检测方法的选择?
一个小哭包
总结来说,MTT法和CCk-8法适用于所有细胞。但如果对细胞增殖或细胞毒性的检测要求不是很高,从经济角度可以选择MTT法。如果对细胞增殖或细胞毒性的检测要求灵敏度非常高,并且希望非常便捷,在研究经费许可的条件下,建议选择使用CCK-8法。
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问
DMSO对冻存细胞复苏的影响?
whilt-shirt
需要立即去除DMSO,低温时DMSO对细胞有保护作用,常温下DMSO对细胞就有毒性了
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问
关于肿瘤细胞悬浮培养?
一个小哭包
主要是,正常细胞和癌细胞相比有接触抑制现象,使其只能贴壁生长;而且癌细胞的质膜结构发生了变化,间隙连接减少或者消失,细胞通讯受阻,发生成摞的生长
5 回答
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问
PCR 扩增的体系条件应该怎么摸?一般要先从哪项开始?为什么进行复合扩增体系条件就要重新摸?
bamboopiggy
如果你不想摸条件的话,可以在你正式pcr cycle前加一个touch down的程序,这样基本都可以跑出条带来。
2 回答
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问
lo2可以用高糖dmem培养吗?用1640长得太慢了感觉?
Xiong205
按照官方推荐培养基比较好,我做lo2不算慢,如果已经是太慢的程度,考虑是否是支原体污染,支原体污染的重要特征之一就是细胞生长速度明显变慢。可以检测一下培养液是否有支原体,如果有用biomy3清除14天左右。细胞状态会变好。
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问
有人用trizol同时提取rna和蛋白过吗?按网上的步骤提取的蛋白质是不是很很难溶解?
天一湖医者
具体的提取步骤如下:1.样品加氯仿分层后,移去上层水相(该水相里就是RNA,可照常继续进行RNA的提取),加0.3ml乙醇沉淀中间层和有机相中的DNA,涡旋混合,室温放置3分钟,2-8℃不超过2000×g离心5分钟。【注:这一步同时可以除去未完全消化的残渣】2.小心吸出沉淀后的上清,加1.5ml异丙醇沉淀蛋白质。室温放置10分钟,2-8℃12000×g离心10分钟弃上清。3.加2ml含0.3M盐酸
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问
大家用超敏化学发光成像仪显影western blot时是怎么加显影液的?
whilt-shirt
显影液现用现配,均匀加在条带上,然后晃匀
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问
gateway clone实验老是失败,要么不长斑,要么长的斑提出来质粒无条带。想请教各位大佬是什么原因?
一个小哭包
培养条件,染菌问题。提质粒也有可能出现问题
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问
肿瘤种植失败的兔还能用吗
一个小哭包
不建议继续使用。有可能会对实验造成干扰,实验数据不正确
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问
分别收集EGF刺激0分钟、5、10、30分钟的1841乳腺癌细胞,提取蛋白质,分别进行酶解,然后采用iTEAQ中的不同核素标记。
bamboopiggy
EGF刺激0分钟、5、10、30分钟的1841乳腺癌细胞中,不同时间点酪氨酸磷酸化位点的变化
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问
乳腺癌细胞中有一些小黑点,是黑胶虫吗?应该怎么办?
Summeryi
正常情况下,细胞也会产生一些小碎片呈现为黑色。还是要观察黑色的点点是否在运动,并且注意细胞的状态
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373 围观
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问
如何给文献作者发邮件借文献中用的细胞系?
Eason老歌迷
如果是国外的,还得是自己学着做。如果是国内的可以试着找联系方式,发邮件问一下。
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问
蛋白诱导时试了37 28 16℃ 都表达在沉淀形成包涵体了 16℃都没有还有再试温度(比如25 32℃)的必要吗?
未来9
诱导温度一般控制在15-25℃时能够减少蛋白包涵体形成,因此25℃以上应该可以形成包涵体。可以再改善温度以外的因素:比如诱导剂浓度等。
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问
细胞没有污染,但经常有漂浮的细胞的原因
番茄炒蛋不加番哈哈
会不会是细胞的状态不好呢?如果是需要基质胶的,也可能基质胶不行吧,我不专门养细胞,有限的认知只能到这一步啦!
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问
细胞培养出现蜂窝状是什么原因
Eason老歌迷
是不是细胞老化呢?如果出现细胞老化,就会有增殖减弱,贴壁能力减弱 你可以用细胞衰老检测试剂盒染色,来判断一下
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问
细胞污染时都会有哪些现象
bamboopiggy
长的速度变慢,细胞出枝叉,液体容易变黄,液体中有小点点,液体中有絮状物
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问
求助,同时跑的胶,为什么会这样,分子量分别为36(内参)、28(AQP2)、65(NK-KB)
Summeryi
第一张背景过强,可以通过增加封闭时间或者洗膜的次数来改善。后面两张的蛋白有不同程度的降解,实验的样品尽量避免反复冻融,并且低温保存~
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问
请问悬浮细胞如何做transwell测细胞迁移能力,具体步骤?按照正常贴壁的做过几次,上室种2万了细胞,染色没有细胞。
bamboopiggy
悬浮细胞穿过膜后会直接掉入下室,移除上室,用倒置显微镜观察可直接计数,在高倍镜下随机选取5个视野进行计数,最后计算平均值。或者收集下室培养液,用流式细胞仪计数
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问
细胞培养密度太低少会死吗?求助
Keven轩
会的,因为细胞在增殖分裂的过程中会旁分泌一些促生长因子,如果细胞密度过低,无法产生这些因子导致细胞增殖更新变慢,导致衰老凋亡
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