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        PCR 扩增的体系条件应该怎么摸?一般要先从哪项开始?为什么进行复合扩增体系条件就要重新摸?

        相关实验:多重 PCR 扩增实验

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        瑶妹AKFI

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        2 个回答

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        如果你不想摸条件的话,可以在你正式pcr cycle前加一个touch down的程序,这样基本都可以跑出条带来。

        user-title

        天一湖医者

        有帮助

          PCR反应的延伸温度一般选择在70~75℃之间,常用温度为72℃,过高的延伸温度不利于引物和模板的结合。PCR延伸反应的时间,可根据待扩增片段的长度而定,一般1Kb以内的DNA片段,延伸时间1min是足够的。3~4kb的靶序列需3~4min;扩增10Kb需延伸至15min。延伸进间过长会导致非特异性扩增带的出现。对低浓度模板的扩增,延伸时间要稍长些。

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