实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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问对于多糖多酚含量较高的种子材料，适合使用什么样的方法进行RNA的提取？

土井挞克树

可以使用trizol法进行rna提取

5 回答529 围观

问M尿蛋白加热乙酸可以是阳性吗？

土井挞克树

可以的，尿蛋白与乙酸可以发生阳性反应

4 回答398 围观

问免疫印迹法和 Western blot具体有什么区别？是同一种吗？

小小翻车鱼

免疫印迹法和Western blot是两种不同的实验方法，尽管它们都是基于免疫学原理的蛋白检测技术。尽管两者有很多相似之处，但它们的操作步骤和侧重点有所不同。1. Western blot：Western blot是一种用于检测蛋白质表达和定量的实验方法。它的基本原理是通过电泳（如SDS-PAGE）分离蛋白质样品，然后将分离的蛋白质转移至硝酸纤维素膜或其他支持物上。接着，通过使用针对特定抗原的特异

5 回答4009 围观

问bv2小胶质细胞被黑椒虫污染后，能再次传代吗？

huarenqiang5

建议使用黑胶虫去除剂把黑胶虫处理后再重新进行实验。

5 回答270 围观

问WB上样时是不是不用做复孔（和CCK8不一样），只需要组之间和样本之间的重复即可？

dxy_xextz7w2

是的，一般是需要重复三次结果即可

8 回答978 围观

问细胞实验MDA检测要重复几次？如何重复？

高山云初

细胞内的检测需要经过适当的处理，即制成约10%的匀浆液，放置-20℃冰箱内，反复冰融3次，然后用显微镜观察细胞是否完全破碎，如不完全则继续冻融2次，再以4000转/分，离心15分钟，匀浆上清液作SOD、MDA测定。而细胞上清则无须这些步骤，直接检测即可。细胞测MDA有以下建议，希望有帮助1.细胞的量要大，用75 cm2的大瓶比较好。细胞量少了最后比色时值可能和空白一样。2.-20度反复冻融三次和超

4 回答1190 围观

问细胞实验WB重复几次？和复孔的关系

dxy_xextz7w2

一般是重复三次，可以是同一个样三次也可以是不同的样三次

8 回答7755 围观

问细菌内毒素实验必须在洁净区做吗，普通的实验室环境可不可以做？

小小翻车鱼

细菌内毒素实验（细菌内毒素检测）通常需要在洁净区（洁净室、洁净台）进行，以确保实验结果的准确性。洁净区可以提供较低的空气悬浮颗粒物（如灰尘、细菌等）的环境，从而减少实验过程中的污染风险。普通的实验室环境可能难以达到实验所需的洁净程度。在进行细菌内毒素实验时，样品中可能存在的内毒素会被误认为是实验结果，导致实验结果的误差。然而，如果实验室的环境足够清洁，并且遵循了严格的无菌操作规程，那么在一定的程度

3 回答2300 围观

问6-磷酸-葡萄糖脱氢酶(G6PDH)、苹果酸氢酶(MDH)用酶标仪测定的计算方法

huarenqiang5

使用96孔板测定的计算公式如下1、血清（浆）6PGDH活力的计算:单位的定义：每mL血清（浆）每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。6PGDH（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷V样÷T=2143.6×ΔA2、组织、细菌或细胞中6PGDH活力的计算:（1）按样本蛋白浓度计算：单位的定义：每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol NADPH定义为一个酶活力

3 回答823 围观

问有什么网站或者软件可以分析蛋白质数据的等电点或者疏水性啥的吗？

高山云初

等电点：https://web.expasy.org/protparam/疏水性：https://web.expasy.org/protscale/

4 回答6795 围观

问如果不知道这个基因的功能可以对此进行敲除吗？

huarenqiang5

没问题，这个基因可以敲除，对生存没有影响。

4 回答145 围观

问qPCR的引物要怎么才能两个种属通用呢？

土井挞克树

只能选择两个种属共同的保守区才能通用

3 回答383 围观

问求助🆘做细菌感染细胞实验过程中，细胞铺板必须要用无抗的培养基吗，若用含双抗的完全培养基对结果影响大吗？

高山云初

在进行细胞实验是,在细胞的培养基中加入细菌测试抗细菌感染性能,测试失败发生细菌感染,应该加入双抗防止细菌扩散,之后换培养液继续培养。双抗就是青链霉素混合液,青链霉素混合液,是专门用于细胞培养的,可以直接添加到细胞培养液内。

4 回答602 围观

问做蛋白转印时，SDSPAGE胶需要电泳到溴酚蓝跑出来吗？还是可以电泳到蛋白marker条带分开到一定程度就可以停止电泳？

dxy_ls40bam

不需要，根据你的蛋白是否跑开决定跑的时间

5 回答1158 围观

问为什么转印结束后立春红染色没有蛋白条带，只有蛋白marker?

dxy_ls40bam

很可能你的蛋白没有转到膜上去。

3 回答1123 围观

问对细胞进行加小分子抑制剂处理，刚开始做了细胞实验有效，后来重新购买药无效了是什么原因呢？

balalaLy

除了跟不同批次药物的影响有关之外，跟细胞的状态也有关。比如传代次数太多细胞老化，对药物的敏感性会改变。

3 回答453 围观

问如何快速有效地进行通路筛选？

sswei

一、信号通路分析中信号接收阶段的检测测定候选药物引起靶点蛋白最初的变化，最常见的是候选药物和位于细胞膜上的靶点受体的结合，或者阻断靶点受体和天然配体的结合，如靶点蛋白结合。一般而言被考虑是部分表型，信号通路分析蛋白–蛋白相互作用链接一个复杂的网络至转录激活和一个报告基因的表达(如荧光素酶，β-内酰胺酶或酶互补耦合)或荧光蛋白(GFP和YFP)，产生一个可测量的发光或荧光信号。有别于将靶点受体重组纯

3 回答2566 围观

问求助，染色体xp27.1微重复485kb

huarenqiang5

这种情况建议做父母的基因对比。

3 回答336 围观

问浆母细胞膜上和记忆性B细胞膜上有哪些标记？例如CD19.CD20.CD21等？

huarenqiang5

浆细胞抗原(PC-1)，可视为浆细胞抗原区别于淋巴细胞的主要膜标志。

3 回答789 围观

问给动物加强免疫后用流式分选出单个b细胞，分到的b细胞是？

土井挞克树

一般初期阶段都是记忆b细胞，后期是其他分群的b细胞

3 回答185 围观

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