做wb蛋白组学分析，大家对于相同kd是直接洗脱后重敷显影还是另外做多一条？有方案的大神可以分享一下

相同KD的蛋白，如果完全重合做好多做一条或重新跑。当然，也可以洗脱一下重新孵育新的抗体，后者可能会出现前一个抗体没有洗掉，或者连同蛋白完全洗掉的情况。

对于相同大小的蛋白，可以洗脱后重新敷一抗或多做一条膜，但如果是表达丰度比较低的话，洗脱后重敷可能导致显影弱或显不出来，这种就需要多做一条膜了

我们都是重做一条的，但是如果时间来不及，条带很好的话，洗脱后重敷显影也是可以的。

如果趋势很好，可以洗掉再曝光另外一个。如果觉得已经爆出来的不好推测另外一个也不好，可以重新跑。

做wb蛋白组学分析， 对于相同kd是直接洗脱后 另外做多一条

做wb蛋白组学分析， 对于相同kd是直接洗脱后重敷显影

一般情况下对于相同kd是直接洗脱后重敷显影。

建议重新再做一次，洗脱的效果很难保证的

分子量相近的不同蛋白（如磷酸化蛋白和总蛋白）、一抗种属来源一致（使用相同的二抗）的情况下，不建议抗体洗脱后再孵育；如一抗种属来源不一致，即使分子量接近的蛋白，只要洗脱够彻底，也不会产生多条带。