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新手求助,小鼠骨髓细胞分选pDC
sswei
磁珠分选的细胞活力会更好,并且因为磁珠分选的工具可以很好的放进无菌台中,所以也不用太担心细胞分选后的染菌问题
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问
求教:细菌培养,菌液浓度
huarenqiang5
常用的菌体浓度的测定方法(细菌计数方法)主要有以下几种,可以根据具体情况进行选择:1. 直接计数法 这是一种非常简单的检测方法,我们可以利用计数板或计数仪直接得出细菌数目。2. 活菌计数法 常用的有平板菌落计数法(cfu法),其原理是每个活细菌在适宜的培养基和良好的生长条件下可以通过生长形成菌落。取一定容量的细菌悬液,制成几个不同的10倍递增稀释液,然后从每个稀释液中分别取
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问
小鼠脾细胞可不可以冻存用于后续融合啊
sswei
从原理上讲,应该是可以融合,但是肯定影响效率
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问
过继荧光标记细胞后续取材需要避光吗?
sswei
过继荧光标记细胞后续取材需要避光。
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问
【求助】微生物平板使用问题
sswei
从冰箱内取出哥伦比亚血琼脂培养基,并使其温度在接种前接近室温.
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问
如何解决胶体金竞争法试纸条的稳定性问题,涉及到灵敏度的
sswei
金标抗体的活性降低,原因一般有以下几种情况:1、首要是干燥,含水量越高,活性越容易丢失。环境湿度尤其重要,还有烤的要干。2、铝箔袋的密闭性要好,不要贪便宜买差的铝箔袋。3、加稳定剂。蔗糖、海藻糖、PVP、L-30、L-90D,and so on。
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问
胶体金烧金
sswei
1、在溶液中用甲基橙使其水溶液呈紫色。2、加入了酸性溶液,使氯金酸的酸性降低,颜色发生变化,变成紫色。
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问
求助 传统过碘酸钠法标记碱性磷酸酶
高山云初
都是需要做的,提高实验成功率。
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T细胞相关通路研究~细胞系选取
高山云初
应该可以,有相关的研究,采用蛋白质组学技术检测转染致瘤基因牌P前后人正常甲状腺Nthy-ori3-1细胞中蛋白质组分的改变
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问
有大佬知道biosensis的FJC染色试剂盒的步骤吗
huarenqiang5
你买试剂盒里面应该有相关步骤,如果没有建议联系客服获取这样结果更准确。
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问
TaqmanPCR跑出的曲线荧光值为什么这么低,引物是对的
sswei
这是比较常见的一个问题,反应管内若留有气泡,温度升高后会导致气泡破裂,使仪器检测到的荧光值突然降低。
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问
scfv在膜上不表达
高山云初
无义序列一般不会,影响的因素有几点:1、翻译起始位点现在大部分的表达载体都提供起始位点,所以它已经把起始密码子与核糖体结合位点的距离进行了优化,一般情况下不需要自己再添加,不过还是要留意载体图谱上是否注明有起始密码子和终止密码子。2、GC含量表达序列中的GC含量超过70%的时候可能会降低蛋白在大肠杆菌中的表达水平。3、mRNA二级结构在起始密码子附近的mRNA二级结构可能会抑制翻译的起始或者造成翻
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问
大肠杆菌
高山云初
不影响实验操作及结果,继续,只是细菌变异了
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问
原代肠道上皮细胞培养
sswei
最重要的是注意污染,肠道本身细菌比较多,必须保持无菌操作,以避免细胞被细菌、真菌等微生物污染。
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问
羊抗鼠血清制备
高山云初
抗血清的制备程序免疫原的配制1、福氏不完全佐剂( Ferund ' S adjuvant , imcomplete , FIA )100克石腊油与50克羊毛脂置于盐水瓶中充分涡旋混匀,过滤除菌或高压灭菌(10P15分钟),置4℃存放备用。(有市售产品, Sigma )2、福氏完全佐剂( Ferund ' S adjuvant , compelete , FCA )取干粉卡介苗25-250mg于10
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求助!小鼠腓肠肌的取材和HE染色
huarenqiang5
1、从新鲜的成年能鼠死亡的腹部或颈部部分取出支配双腿的坐骨神经及其腓肠肌。 2、清理材料:洗去血清、脂肪、臀神经和肌纤维,只保留神经路径及肌肉纤维。 3、固定:将取出的神经和肌肉泡入4%氯化钠溶液中,浸泡数小时以固定神经肌肉。 4、浸泡:将固定的标本浸泡在硝酸甘油溶液中,以去除表面的脂肪和蛋白质。
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外排泵高表达
高山云初
没有倍数标准,比标准高就可以。
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问
蛋白体外诱导巨噬细胞向m1极化与将蛋白免疫小鼠后诱导th1/th2混合免疫反应有矛盾吗
sswei
对于先天的免疫反应来说,最基础的效应器和管理器是单核细胞和巨噬细胞。这些细胞在防卫机体免受外源物质的侵扰方面发挥着它们的关键作用,同时,它们在炎症形成和免疫屏障退行等方面,也起着相当重要的作用,因为它们具有抗感染和抗诱导的功能。受细胞周边环境的影响,巨噬细胞的表型可以发生改变。众所周知,经典的处于激活状态的促炎巨噬细胞M1为Th1型反应和抗肿瘤的反应起到重要的促进作用。另一方面,在交替变化中被激活
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问
【求助】EAE模型的MOG多肽真的溶于PBS吗?
sswei
多肽(Peptide)是由氨基酸分子组成的短链寡聚肽或多肽,具有生物活性。多肽溶解度通常受多种条件的影响,包括温度、pH、离子强度等因素,这些条件能够影响其胶束形成、电荷特性和亲疏水性等性质。由此可见,多肽在水中是否溶解,以及在PBS缓冲液中是否溶解,需要考虑其自身化学特性和溶剂条件。一般来说,PBS缓冲液的离子强度和pH值都很接近生理条件,且溶液中含有磷酸盐离子,有助于维持生物大分子的结构和功能
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问
关于细胞转染后AMP使用的浓度
huarenqiang5
细胞转染后AMP一般建议使用浓度在80nm左右比较好。
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