丁香通
丁香园
论坛
医药招聘
丁香医生
更多
调查派
用药助手
丁香搜索
医药数据库
来问医生
我要登录
|
免费注册
|
我的丁香通
企业机构:
成为企业机构
个人用户:
个人中心
移动端
搜实验
大家都在搜
大家都在搜
0 人通过求购买到了急需的产品
免费发布求购
搜索
发布求购
实验专区
实验库(10000+)
实验问答
实验专题
热门视频
前沿资讯
科研者之家
丁香通
>
实验专区
>
实验问答
>
全部
实验问答
28,789,327 科研人在看
我要提问
全部
细胞
免疫
蛋白质
PCR
DNA
RNA
微生物
动物
遗传
生物信息
其他
问
膜蛋白BN-PAGE,条带无法跑下来怎么办
天一湖医者
提蛋白裂解液太强或者时间太长 蛋白挂了 或者裂解液太弱 时间太短 裂解不充分蛋白浓度太低蛋白太小跑出去了 或者太大没跑下来转膜时间太短没转过去或者太长转过了抗体保存不当失效了二抗搞错了显色液有问题显色时间太长
3 回答
795 围观
3 回答
795 围观
去回答
问
荧光素酶实验用酶标仪测荧光的时候,直接用96孔板上机可以吗?需要特制的板吗?
bamboopiggy
不要用透明的细胞培养板,有那种不透明的黑色或白色的96孔板
3 回答
2091 围观
3 回答
2091 围观
去回答
问
请问荧光素酶实验时,对细胞密度有要求吗?
bamboopiggy
有,按照你用的荧光素酶公司的protocol来做,否则太低,可能测不出差异
1 回答
552 围观
1 回答
552 围观
去回答
问
新配制的一抗,孵出来蛋白条带只有细细的一条条带,形状像marker一样,不知道什么原因?
whilt-shirt
有可能是你的蛋白浓度太低,建议增加上样量
4 回答
595 围观
4 回答
595 围观
去回答
问
电转两个半小时之后,分子量大的marker还在胶上,请问这是什么原因?
bamboopiggy
你转膜的条件是多少?反正400mA ,一小时10分钟左右,300kd的蛋白是可以转过去的
3 回答
470 围观
3 回答
470 围观
去回答
问
cDNA长期保存用TE还是处理水
dxy_gwrp7ndq
可以用无菌水-20°保存DNA样品可以保存1到2年没有问题的,但要避免反复冻融,TE还涉及到后续添加的镁离子的溶度、PH的问题
5 回答
1628 围观
5 回答
1628 围观
去回答
问
CCK8
府宅
CCK-8的OD值处在1.0左右是比较好的检测结果,对后续实验的稳定性有益
3 回答
3892 围观
3 回答
3892 围观
去回答
问
扩增的蛋白在5000左右,怎么扩增,为什么我的总是弥散
Eason老歌迷
总是出现弥散的话 可能是在PCR反应体系中一链产物的含量过高,你可以减少引物的用量,减少PCR的循环次数,在用DNase处理被DNA污染的RNA样品时,其产生的寡核苷酸片段会产生非特异性扩增,一般会显示为弥散背景。
3 回答
372 围观
3 回答
372 围观
去回答
问
为什么有时候转完膜后mark大条带65KD以上的条带经常会花,扭曲,飘
bamboopiggy
蛋白呢?如果蛋白也这样,那是转膜没转好。如果蛋白没问题,那可能是你的marker降解了
3 回答
2820 围观
3 回答
2820 围观
去回答
问
western 电泳后前两块胶在marker 左侧又泳出了marker 条带,而后两块胶没有问题,电泳液都是现配后预冷
balalaLy
第一个孔什么都没加的话旁边的会溢散过来,所以最好是加适量的loading buffer
4 回答
428 围观
4 回答
428 围观
去回答
问
关于会议论文投稿结果的问题
dxy_gwrp7ndq
学术会议主要是发言交流,壁报交流,书面交流
3 回答
1764 围观
3 回答
1764 围观
去回答
问
各位老师,请教一下英文meta分析中可以纳入中文普刊吗,怎么引用呢?
府宅
可以!引用参考文献时附上链接网址就可以了,而且纳入不纳入,是根据事先设定的纳入标准和文献质量评价,并不是看发表的杂志
2 回答
728 围观
2 回答
728 围观
去回答
问
关于基因敲除鼠的RNA-seq结果
bamboopiggy
应该是敲除鼠的A基因检测不到才对,否则就是seq出问题了。
1 回答
492 围观
1 回答
492 围观
去回答
问
请问侵袭实验,铺板36小时后,小室内有一坨坨的东西呢?
balalaLy
应该是上室的聚在一起的细胞,不影响结果的
3 回答
652 围观
3 回答
652 围观
去回答
问
膜片钳破膜
Eason老歌迷
我感觉细胞状态是最大的问题,另外接触细胞之后压电极的速度和程度也有些关系,前者需要在你培养和转染条件上多考虑,后者就是手感了~~lipo2000说明书上建议的总质粒:lipo是1:2,但我做过条件优化,我转染用的比例是1:1。当然也要看你转多少个质粒,质粒浓度是多少,因为lipo多了细胞容易死。细胞密度我用70%左右,我的是HEK293B细胞,细胞周期较小,间隔时间就稍微短,理论上越接近对数期越好
3 回答
984 围观
3 回答
984 围观
去回答
问
求助 周围感觉神经上的神经树突标志物
dxy_gwrp7ndq
神经元树突标志物 SAP102。
3 回答
565 围观
3 回答
565 围观
去回答
问
我今天跑wb,配制错误比例的电泳液影响实验结果吗?
秋秋欣欣
会有一定的影响,但是可能也能跑出来
3 回答
936 围观
3 回答
936 围观
去回答
问
为什么跑的wb总是有杂带?还有黑点
balalaLy
留意一下你的目的条带的正确位置,说明书上的不一定是正确的,从这张膜上看可能是最下面那条,下次把膜剪宽一点,降低一下抗体浓度,洗膜时间可以稍长一点
5 回答
567 围观
5 回答
567 围观
去回答
问
wb大佬帮我看看,我这膜怎么跑成这样了?
balalaLy
可以确定你的目的条带是中间那条淡的还是底下边边那条,如果是中间那条,就把边边那个位置切掉重新显影
4 回答
250 围观
4 回答
250 围观
去回答
问
请问有同盟养过Caco2细胞吗?传第一代还行,慢慢的长不起来了,容易污染,是否是传代过程中的问题,有细胞碎片产生。可以传授经验吗
府宅
Caco-2细胞生长太满对细胞状态影响严重,传代后易碎,死亡。该细胞对Glutamin,Sodium Pyruvate还是有较高要求的,及时添加吧。
3 回答
1200 围观
3 回答
1200 围观
去回答
1
•••
657
658
659
660
661
•••
1010
跳至
页
意见反馈
合作咨询
提问
扫一扫
领取干货资料
反馈
TOP
打开小程序