实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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问RNA转染时所用培养基需要全新的吗

bamboopiggy

只要你的枪尖是高压灭菌过的，就没有问题。但是要用无血清的。

3 回答453 围观

问氧化铁纳米颗粒虽然粒径很小，但很难过0.22um的滤膜，大家有什么解决方案吗？

Eason老歌迷

虽然可能是粒径很小，但是考虑有没有吸附的作用?

1 回答351 围观

问磷酸化抗体的检测样本制备时是否一定要加NaF等？

bamboopiggy

NaF属于危险品，现在很难买了。一般这样的样品，你可以在lysis里面加点磷酸酶抑制剂。

3 回答157 围观

问WB条带总是歪的，加样也很正，不知道什么原因

秋秋欣欣

那可能是你配胶没混匀的问题，没凝好吧

6 回答1843 围观

问WB实验有关问题

n0y0j7

你的大鼠模型，一抗就是a抗鼠，二抗就是b抗a.一抗是a身上取得，就叫a抗。二抗是b身上取得，叫b抗。常用的是兔抗鼠、羊抗兔组合。人体的标本就是鼠抗人，兔抗鼠。或者兔抗人，羊抗兔。

4 回答3250 围观

问想测pi3k表达量，分为好几个亚基，该怎么选一抗呢

whilt-shirt

根据你的下游蛋白是受哪个亚基影响来选择

1 回答221 围观

问【求助】HEPES可以用PBS代替嘛？

东北的雪狼

联系不要用PBS代替，会影响实验结果。

5 回答1442 围观

问线粒体亚基蛋白怎么提取呀

Eason老歌迷

先破碎细胞保存线粒体活性，在分离线粒体，最后破碎线粒体，提取线粒体蛋白

4 回答473 围观

问在qpcr实验中一个奇怪的现象！

汤姆卜丽波

这种情况要么是模板量低或者是你的基因表达丰度不高

3 回答464 围观

问蛋白提取SDS-PAGE相关问题？

申东熙老伯

可能是蛋白浓度太低，浓缩一下试试。

7 回答641 围观

问为什么上样25ul跑胶始终是弥散的没有达到浓缩的目的？

申东熙老伯

你的样品是怎么处理的，应该超声破碎之后煮样，加足量的loading就可以了。

6 回答195 围观

问RIP实验为什么不能用CHIP实验代替呢？研究蛋白与重复序列的相互作用为什么用RIP不用CHIP呢？

Eason老歌迷

研究蛋白与重复序列的相互作用为什么用RIP不用CHIP呢?是因为chip交联的效率可能只有5%，甚至更低。你也许错过了相当一部分的结合位点。CHIP并不像RIP那样是定量的，它无法区分RNA结合蛋白与这个或那个RNA目标的相对亲和力。

3 回答433 围观

问分子量小于1万道尔顿的，使用什么蛋白marker?电泳条件是什么？

bamboopiggy

你去一些卖marker的官网上找，保证有小于10KD的marker可以用，建议你用15%的胶跑就可以

2 回答376 围观

问为什么跑出来的内参条带会连在一起？？

sophomore

一是上样量，需要调整；二是内参的选择，根据实验需要再做优化；还有就是分离胶，积层胶的配制，根据实验方法调整下比例。如果还是跑的条带不满意，可以试用预制胶做，观察下实验结果。

5 回答438 围观

问DNA检测时，蛋白消化效果怎么评估？

天一湖医者

对消化后的蛋白残留量进行评价WB比较好。

1 回答294 围观

问酵母单杂筛库

天雨心晴

从图片看，不像污染了，像是时间长了。

3 回答2423 围观

问CCK8

bamboopiggy

你做cck8的标曲作什么呢？判断细胞数？可以X轴细胞数，Y轴OD值，选择散点图，插入趋势线，然后选择公式，就可以得到y=ax+b，你知道了y的值，就可以得出x的值。

3 回答1134 围观

问流式细胞摄取实验数据大神指点怎么处理啊？跪求各位

Eason老歌迷

有没有使用补偿算法和归一算法对原始数据进行处理啊

1 回答244 围观

问想请问一下大佬们关于CCD-18co的培养方法

汤姆卜丽波

这样，你可以试着增大血清比例或者用F12试一下

2 回答298 围观

问miRNA minics和质粒进行共转染？

Eason老歌迷

理论上共转染的时候minics和质粒可以分别用不同的转染试剂进行转染。但是我没有试过这种方法。

2 回答1338 围观

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