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问
显像时背景很脏而且marker很浅
Eason老歌迷
如果背景脏,可能是你的封闭时间太短了,可以适当延长,也可能是你的抗体浓度太高。maker在转膜后很清晰,但是孵育完抗体就变淡,我也遇到过,我觉得不影响显影就没事。
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问
葡聚糖包覆的氧化铁能被间充质干细胞摄取吗
Eason老歌迷
葡聚糖包覆的氧化铁能被间充质干细胞摄取。
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问
共聚焦拍摄荧光图片没有固定拍摄参数
balalaLy
没有固定参数这样拍出来的图片不可信
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问
HIF-1a蛋白WB结果求助
Eason老歌迷
Hif-α的表达受细胞内氧浓度的高度调控,在低氧状态下表达会增多。HIF-1α在常氧下(21%O2)也有表达,只要O2>5%,即很快被细胞内氧依赖性泛素蛋白酶降解途径所降解!
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问
组蛋白ChIP-Seq后,如何设计ChIP-qPCR引物验证某个基因测序结果?
Eason老歌迷
上ucsc网站,可以在搜索框中输入基因名,然后点击go,会出现它的位置,以及对应的富集区域。我们可以看到有富集峰,则可以选择这段的序列设计引物了。如果是有peak信息且富集的程度非常强的话可以设计当成阳性对照,阴性对照找没有peak富集的地方。
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问
骨肉瘤原位模型造模求助
Eason老歌迷
每侧10的6次方,注射入裸鼠后股骨下段髓腔。
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问
加入cck-8时,用的培养基可以用无血清的吗
balalaLy
标准做法就是用的无血清的培养基呀
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问
transwell问题求助
balalaLy
看着应该是染色没有染好,结晶紫染久一点
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问
乙磺酸尼达尼布给c57小鼠灌胃,如何完全取出胶囊里面的药液?用什么溶剂溶解好呢?
Eason老歌迷
用注射器抽取即可,丢失量可以忽略不计,而且丢失的都一样。
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问
大鼠因为中暑死亡表现是什么
balalaLy
一开始会比较兴奋乱跑乱抓,慢慢的活动性下降。
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问
求助SD大鼠的M1区体表定位方法
Eason老歌迷
有一本大鼠大脑定位图谱,你可以看看我发给你。
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问
小鼠腹腔注射给药后,腹部肿胀,第五天后死亡
balalaLy
偶然事件,应该就是操作不当导致的腹膜感染
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问
双酶切鉴定实验有目的条带,但是底部也出现非特异性条带。
Eason老歌迷
可能是出现了非特异性酶切。是不是你的酶切时间过长,我试过最长切过8小时,有一些内切酶会出现这种情况了。是不是配的酶切体系当中,酶的体积超过了总体积的10%,过量的甘油会影响。
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问
想用流式细胞术测凋亡,应该用双染法么?代理商给我推荐的BD的这种试剂盒。还请问流式细胞术测凋亡应该注意的tips是什么
balalaLy
操作的时候动作要轻柔,染色后尽快检测
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问
如何对分光光度计的数据进行处理?还有一些实验上的细节性问题?有人能搭理一下我吗?
Eason老歌迷
测出标准的已知浓度值溶液对某一波长光的吸收率E,做出吸收率E与溶液浓度N的曲线.然后,对未知浓度溶液在同一波长光下,测出其吸收率,从曲线上就可以求出其浓度值,改变波长,可以重新做出对这一波长的吸收率E与溶液浓度N的曲线,再进行测量。
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问
组化中二甲苯1,二甲苯2,二甲苯3有区别?
Eason老歌迷
二甲苯1、2、3主要是为了充分脱蜡,每道二甲苯内5~15min,在初次使用时一般没有区别,用纯的二甲苯就可以,脱几次以后二甲苯3、2、1中的蜡的浓度肯定是依次升高的,所以建议每500ml的液体处理500张左右的切片以后更换一次为宜;酒精梯度入水,酒精浓度分别为:95%、90%、80%和70%,每道酒精5~15min,过酒精主要是为了充分去除对人体有害的二甲苯,但在高浓度的酒精中时间过久可以引起组织
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问
为什么通过elisa、WB能检测到的蛋白在itraq实验中没有检测到?
Eason老歌迷
质谱不是专一性检测的,而是选择样品中丰度较高的蛋白质优先检测,而丰度较低的蛋白质则因为肽段信号过弱被淹没而不能被检测到。因此,如果样品中待检测的目标蛋白质丰度较低(或者蛋白质分子量较小),即使 WB 能够检测到,质谱并不一定能检测到
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问
LPS造模剂量摸索
Eason老歌迷
下一步你可以在1-15之间进行筛选
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问
组织片TUNEL染色后凋亡率计算
Eason老歌迷
可以用iamgeJ来计算。也可以人工来算,首先是选取5个高倍视野,找500个细胞来数凋亡数,然后比值。
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问
RNA稳定放线菌素D实验,结果曲线在某一时间点忽然翘起的原因?
Eason老歌迷
放线菌素D抑制RNA合成,是不是在这个时间点实验条件抑制了它的作用
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