双酶切鉴定实验有目的条带，但是底部也出现非特异性条带。

可能是出现了非特异性酶切。是不是你的酶切时间过长，我试过最长切过8小时，有一些内切酶会出现这种情况了。是不是配的酶切体系当中，酶的体积超过了总体积的10%，过量的甘油会影响。

有可能是抗体浓度过高或者抗体特异性不好导致的

分析可能的原因:

1，酶用量过高

2，酶切时间不合适

3，酶切温度过高（蛋白不稳定）