WB中浓缩胶的量一般是多少，蛋白跑出浓缩胶后没有浓缩成一条线，而是拖的很严重是为什么，该如何解决

拖尾原因：

1.上样量不均，从内参就能看出，建议检测总蛋白浓度后调节至相同用量如50ug；

2.可能与蛋白变性、凝胶质量、电泳条件、封闭条件、抗体特异性有关，建议调至相同浓度后变性，可进行80、120v电泳，室温封闭2-3h，降低一抗浓度（增加稀释倍数），可降低所用蛋白总量。

拖尾严重可以增加一抗的稀释倍数，延长封闭时间，降低二抗浓度，上样前也可以对样品离心，之后再继续电泳

你胶的浓度是不是没有调好，还有就是电泳恒压，不要跑太快，一般都是90v先，然后跑完浓缩胶后在调120V上下

浓缩胶一般是3-5毫升，蛋白拖尾严重可能是裂解问题，制备样品的时候可以超声破碎之后再高温煮。

浓缩胶的浓度比较低（5%丙烯酰胺-甲叉双丙烯酰胺），加样的时候蛋白是分布在加样孔中的，要同一水平线上啊，要不没办法。

可能有两个原因。1.浓缩胶的浓度是否正确？2.蛋白跑之前是否有降解。