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PCR电泳无扩增条带
灵枢天问
如果电泳没条带那是不是你加样有问题引物用错了?至少有一点模板吧
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问
我要提不同龄(1至4龄、蛹、成虫)的RNA,各阶段昆虫要如何取样?按重量取还是按头数取?
Dr_劉医生
按头数取,提RNA的组织和每个个体相关,和重量没关系,
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问
wb翻车了,求解答
Dr_劉医生
出现非特异性的杂带可能是抗体纯度不够,高纯度抗体条带特异性更好,建议更换抗体;此外也可以加长BSA封闭时间,和洗膜的时候多洗几次可以降低杂带干扰
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问
市场上的脱脂牛奶可以直接用来封闭吗?
Dr_劉医生
可以用,脱脂奶粉中主要是乳清蛋白和酪蛋白。原理就是用非抗原的蛋白去封闭膜,避免标记抗体固定在膜上引起背景增高。但也只能用WesterBlot,如果要做ELISA或者phage display时候,蛋白铺板的话,不能使用脱脂奶粉。
3 回答
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问
基因敲除载体的构建
vlinine
觉得先将3个目的基因分别双酶切之后用T4 DNA连接酶连接之后再连接到载体上
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问
荧光定量PCR,可以一个实验组一个cDNA浓度做吗
bamboopiggy
不能一个组一个浓度,cdna的浓度要差不多才有可比性
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问
【求助】实时荧光定量PCR内参基因溶解曲线问题
bamboopiggy
高度不是问题,只要起峰的位置一致就可以。
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问
细胞活力
bamboopiggy
你怎么确定你6孔板和96孔板细胞的密度是一样的?一般,你要控制加液体的体积,药物浓度,以及细胞数,即使计算出来细胞的活力在50%,也是个相对数,大概在6孔板中,可能活力在50-70%,虽然细胞死了,已经没法和cck8反应了,但是不一定是飘在培养基中,可能还是贴壁状态。肉眼看是看不出来的。
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问
细胞荷瘤相关问题
bamboopiggy
H226是肺癌细胞系,ovcar-3是卵巢癌细胞系,你可以试试提高细胞数量,一般5-10x10^6试试
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问
求助|pha刺激pbmc后细胞贴壁,完全吹不下来
bamboopiggy
是的,刺激以后帖壁,如下要弄下来,就胰酶消化。
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问
灌胃的时候大鼠老是仰卧起坐,拿腿蹬我,有什么好招吗
Dr_劉医生
大鼠戴好手套用拇指和食指固定颈部,一定要用点力;尾巴拉直绕在无名指上,绷住了腿就不会动了
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问
注射小鼠问题
土井挞克树
不建议稀释,这个少量稀释难以改变粘稠,但是稀释液过多会影响小鼠代谢,还是建议换静脉或者改变针头口径
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446 围观
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问
T细胞活化
土井挞克树
首先回答第一个问题,平底的板子肯定没有问题。二,活化方面,首先你要保证你的抗体包被没有问题。抗体包被用无菌 PBS 将 anti-mouse CD3 抗体(克隆号:145-2C11)稀释至 5μg/ml,稀释后的抗体加入到 24 孔板中,每孔 400μl,4°C 包被过夜。(注:板子在加入抗体之前,先用无菌 PBS 润洗 2-3 遍,避免干孔);抗体包被不行肯定影响实验结果其次细胞刺激(次日)扩增
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问
absin gp91 ds-tat
土井挞克树
储存方式:-20°C溶解方式这个可以查一下用该试剂做的文章,文章里一般有写
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410 围观
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问
WB条带
此用户已注销
电泳缓冲液用的次数过多,一般来说电泳缓冲液用过两次以后电泳的效果就会变差
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548 围观
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问
干细胞诱导分化出现的问题
申东熙老伯
会受代数影响,建议使用传代次数小一些的干细胞。
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294 围观
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问
求问这个细胞是真菌污染了吗?
bamboopiggy
是污染了,你别用了,换新的吧。
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245 围观
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问
炎症模型可以直接用thp1,而不用pma诱导吗
vlinine
不可以,需要用pma诱导 才能成功构建模型
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817 围观
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问
分子对接分析中,运行autodock后工作目录已经有了.dlg文件,但autodock运行小模块还未结束,需要继续等自动关闭吗?
vlinine
需要继续等自动关闭,以免产生其他影响
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859 围观
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问
腺病毒可以用于大鼠的转染吗?影响吗?
汤姆卜丽波
可以啊,腺病毒是心机细胞转染的最佳选择,所以可能是其他部分出现了问题
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