实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

全部

细胞

问小鼠麻醉

土井挞克树

可以用苯巴比妥麻醉，不会对脑组织产生影响，一般是100-120mg/kg的用量

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问请问各位老师，分泌蛋白跑WB，内参应该选什么呢

土井挞克树

内参一般可以选择β-actin、β-tubulin等

3 回答1850 围观

问求助SOS

loveliufudan

一些建议:1. 检查培养基的组成和配置是否合适。神经干细胞对培养基要求较高,确保每一项成分的量及比例是否符合标准。2. 检查培养箱的环境条件,如温度、湿度、CO2浓度等是否稳定适宜。这些条件的波动也会影响细胞的生长。3. 重新用新鲜细胞进行培养试验,确定问题出在细胞自身还是培养过程。冻存的细胞可能活性下降。4. 尝试更换其他品牌的培养基系统,有些成熟的产品可能更符合神经干细胞的需求。5. 观察细胞

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问求助！小鼠坐骨神经如何定位？

高山云初

鼠取俯卧位，固定四肢。用手指在大腿部位感觉股骨位置，以此为骨性标志在股骨浅层剪开皮肤，切口位置为股骨在体表的投影位置。打开皮肤后可见一条明显的白线，为肌肉间的筋膜，沿此白线将其剪开一个小口，深入血管钳沿白线方向分开钝性分离，分开白线后可见两块肌肉之间的坐骨神经干

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问酒精性肝损伤

高山云初

急性酒精灌胃模型的建立方法：采用成熟的雄性Wistar或SD大鼠，用56°白酒灌胃，每次7ml/kg，每日2次，或腹腔注射一定浓度乙醇，每次20ml/kg，每日2次，建立急性酒精性肝损伤模型，表现为肝细胞脂肪变性,伴轻度气球样变和炎细胞浸润。

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问elisa和比色法对脑组织的预处理有什么不一样吗

土井挞克树

预处理差不多，都需要对组织预冷之后固定

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问配电极液和电转液先加粉剂还是先加溶液定量

huarenqiang5

电转液配方的过程通常包括以下步骤：首先将电解质固体加入溶剂中，然后加入适量的添加剂，搅拌均匀，直到电解质固体完全溶解。在制备过程中，需要注意的是，应该控制好电解质固体的溶解度和添加剂的用量，以确保电转液的性能符合要求。

3 回答202 围观

问细菌与细胞共培养问题

feixue7758527w

保证细胞不死，就要注意细菌的用量的，不能太多也不能太少，这个计量要慢慢摸索的

3 回答633 围观

问线粒体生物发生相关问题

huarenqiang5

主要指标有线粒体呼吸链酶活性、线粒体膜电位、线粒体DNA含量、线粒体膜通透性等。

3 回答245 围观

问这个石蜡切片看起来有什么问题吗？

feixue7758527w

看起来有点褶皱的，这样很容易出现组织重叠的，可能切的有点薄了

5 回答271 围观

问细胞无缘由死亡是什么原因啊？

feixue7758527w

细胞不会无缘无故死亡，大多数都是培养基更换时间或太长，或者细菌污染导致的。

6 回答461 围观

问微生物平板怎么使用？

feixue7758527w

这个要看你具体进行什么试验？是划痕实验？还是药敏试验，还是微生物接种？

5 回答742 围观

问测定禽流感病毒H9N2的EID50，接胚后48h吸取尿囊液测血凝，发现都无血凝性，是怎么回事？-7稀释度死亡3个，-8死亡2个

土井挞克树

是否存在抗凝剂污染导致的凝集度改变，也有可能是细菌感染了

4 回答630 围观

问求助！糖尿病模型组血糖连续三周降低，该怎么补救？？？

土井挞克树

停药，观察血糖变化，持续低需要重新造模

3 回答397 围观

问请教法夫酵母原生质体转化的具体方法。

huarenqiang5

首先利用Macerozyme（离析酶）降解叶片组织中的果胶物质，分离成单个细胞，然后利用Onozuka纤维素酶降解细胞壁，从而分离原生质体。

3 回答481 围观

问蛋白组学的鉴定方法有哪些？各方法的优缺点？

土井挞克树

常用的有质谱法和芯片法，质谱法应用范围广泛，芯片法敏感度高

3 回答856 围观

问质谱技术如何应用于研究蛋白质研究

高山云初

可以分析生物样本中蛋白质的表达和修饰情况，发现与疾病相关的一些生物标志物

4 回答478 围观

问最近筛选纯化了几个单克隆抗体，扩增可变区送测序，发现这几个单抗可变区序列都一样，咋回事呢，理论上不同杂交瘤产生的单抗应该不同的吧

huarenqiang5

考虑是你用的抗体是同一种抗体所导致的。

3 回答463 围观

问做SDSPAGE跑蛋白胶，我的基因预测出来的蛋白是10kda，用的载体是pgex，26kDa，跑出来的胶图是35kda左右

高山云初

会把载体上的所有基因表达一遍,当然,基因本身不受影响。

3 回答398 围观

问Lineweaver-Burk 双倒数法判断出对α-葡萄糖苷酶的抑制类型，具体步骤怎么做

龙大人驾到

使用Lineweaver-Burk双倒数法（Lineweaver-Burk plot）可以帮助确定对α-葡萄糖苷酶的抑制类型，常见的抑制类型包括竞争性抑制、非竞争性抑制和混合型抑制。以下是使用Lineweaver-Burk双倒数法进行抑制类型判断的具体步骤：1. 准备实验样品：准备一定浓度范围内的底物（α-葡萄糖）和不同浓度的抑制剂（例如，抑制剂A、B、C等）。确保所有试剂的浓度和制备方式准确无误

3 回答4224 围观

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