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问
采用低渗处理方法提取的红细胞膜如何保存?
huarenqiang5
一般建议保存温度在(4±2℃)中。
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问
脂肪细胞分化鉴定除了油红O以及甘油三酯的鉴定,还有什么其他方法吗?
土井挞克树
可以使用pcr检测特征性基团,如lpl,ppar等
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问
WB半干转15V1.5h转蛋白失败原因?(pvdf膜已激活/顺序没错/目的蛋白11—14kd/marker一点没转上/装置OK)
土井挞克树
可能是时间太短的缘故,建议延长时间至2h
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问
二维电泳为什么可以将不同种类的蛋白质进行高分辨率的分离?
小小翻车鱼
在等电聚焦阶段,蛋白质首先按照它们的等电点(pI)进行分离。等电点是指蛋白质电荷为零的状态。不同种类的蛋白质具有不同的pI值,因此可以通过调整pH梯度使得蛋白质在电场中的迁移位置达到各自的等电点,进而实现分离。在IEF阶段之后,蛋白质进一步按照分子质量进行分离。在这一阶段,蛋白质与SDS(十二烷基硫酸钠)结合,使得蛋白质带上负电荷,并按照分子质量的大小进行分离。SDS-PAGE利用聚丙烯酰胺凝胶进
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问
做SNP的统计分析流程是什么?
小小翻车鱼
以下是进行SNP统计分析的一般流程:1. 数据准备:首先需要收集SNP芯片或者测序数据,并整理为可读取的格式。同时,需要收集表型数据,如病例与对照的临床信息等。2. 数据质控:在分析之前需要进行数据质控,包括SNP和样本质量控制。对于SNP数据,可以检查基因型频率是否符合Hardy-Weinberg平衡,以及缺失数据和错误基因型的比例是否过高等。对于样本数据,可以检查样本是否存在批次效应和离群值等
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问
western blot条带是沙状、由点构成请问是怎么回事?
土井挞克树
封闭不足,背景存在污染,建议多冲洗几遍
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问
基因组 DNA 进行 PCR 之后电泳结果条带宽
周末也要努力呀
跑胶的时候没有压好,跑慢一点。
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问
小鼠化疗清髓后,为了预防感染,请问用的抗生素是人用的还是兽药
周末也要努力呀
老鼠适应兽用抗生素,计量也得按照个体进行注射
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问
H9C2细胞的Myh7,Anp,Dkk2引物为什么p不出来呢
土井挞克树
考虑是cdna的纯度不够,建议选用纯度高的cdna
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问
cited species是什么意思,也是可以发生发硬的种属吗
土井挞克树
是可以发生免疫应答的种属,一般用作抗体比较多
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问
ROS活性氧检测 DCFH-DA检测
土井挞克树
考虑空白组可能存在污染,比如荧光剂污染就会出现空白组荧光强这个问题
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问
大鼠癫痫持续状态模型建模
小小翻车鱼
1. 癫痫发作的判定标准:在大鼠中,癫痫发作的判定标准通常包括以下几种表现: a. 出现强直、阵挛等明显的抽搐现象。 b. 动物出现肌肉僵硬、呼吸急促、心率加快等生理反应。 c. 脑电图(EEG)记录到明显的癫痫样放电。2. 给予地西泮的时间:在大鼠出现癫痫发作的迹象后,应尽快(如几秒钟内)给予地西泮,以终止发作。地西泮是一种GABA受体激动剂,可以增强GABA的抑制作用,从而降低神经
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问
请问如何能从二级质谱为蛋白定性?
huarenqiang5
利用液相色谱串联质谱(LC-MS-MS)的方式检测。先通过液相进行有效分离,将各蛋白质组分分开,再通过二级质谱进行片段化检测定性,真正的将蛋白定性做到速度快且数据精准。
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问
【求助】请问高脂联合腹腔注射维生素D3建立大鼠动脉粥样硬化模型有成功的吗?用了多久
Luckybabygirl
高脂饮食至少21天,其他的你得参考文献,我们是小鼠喂养3周,第四周进行相应的干预,和你的干预条件不一样哈,另外,饲料配比你得摸索,我们按文献里的设计,小鼠吃的不好,因为受温度,批次以及各种条件的影响,然后我们加了一些坚果类的东西进去,就是香了一点,小鼠吃的很开心,也是文献支撑的嗷。所以你在设计饲料的时候第一次少买一点,以免浪费
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问
小鼠E11.5天胚胎太小没有成形怎么办
江朵朵_
你是用胚胎来做什么实验呢?如果是原代细胞的话好像都是取14天左右的胚胎,这时候胚胎已经成型了
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问
如何提取细胞上清液?
dxy_9njnv24q
吸取细胞上清液,然后离心沉淀细胞碎片,或者是用过滤器过滤上清液即可
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问
DC细胞的抗原提呈实验步骤?
周末也要努力呀
DC细胞抗原提呈实验步骤如下:1. 培养和收集DC细胞:使用培养基(如RPMI 1640)培养DC细胞,通常使用骨髓源或外周血单个核细胞(PBMC)分离的细胞。收集细胞后,用PBS洗涤细胞。2. 处理抗原:选择合适的抗原,如蛋白质、多肽或细胞裂解物。将抗原处理成合适的浓度。3. 刺激DC细胞:将DC细胞与抗原共同培养。通常使用1-2μg/mL的抗原浓度。培养时间可以根据实验需要而定,一般为24-4
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问
有何种方法可以证明TLR4受体可以识别PGN?
周末也要努力呀
1. 细胞系实验:使用TLR4表达的细胞系(如HEK293T/TLR4细胞)和对照细胞系(如HEK293T/空白细胞)进行实验。将PGN添加到细胞培养基中,观察TLR4细胞系是否产生细胞因子(如TNF-α、IL-6等)的释放,而对照细胞系则不产生。这表明TLR4受体能够识别PGN并触发细胞信号通路。2. RNA或蛋白质水平的检测:使用实时定量PCR或免疫印迹等技术,检测TLR4基因或蛋白质的表达水
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问
细胞实验我要加一种通路抑制剂,如何确定通路抑制剂的浓度和作用时间?是IC50吗?(查文献只有个参考范围,如何精准确定浓度)
高山云初
抑制剂的使用量受多种因素影响,包括抑制对象的可接触性,细胞通透性,孵育时间,细胞种类等等。我们建议通过检索文献确定使用抑制剂的起始浓度。如果有报道的K i 值或IC 50值,可以采用其5-10倍的量开始尝试以达到抑制酶活性的最佳效果。如果抑制剂的K i 值或IC 50值未知,则需要在更广泛的范围尝试抑制剂的使用浓度,并采用Michaelis-Menten动力学计算K i 值。采用高浓度抑制剂而没有
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问
【小鼠创面】怎么固定敷料
xxzheng
有实验鼠专用的伊丽莎白圈可以防止啃咬,有上市的这类辅助装置,比如睦科、KENT,文献中基本都用的这个办法。Rosenberg A, Inagaki F, Kato T, et al. Wound healing after excision of subcutaneous tumors treated with near‐infrared photoimmunotherapy[J]. Cancer
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