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问
CasRx系统引物设计
土井挞克树
1.sgRNA设计1.1设计原则1) II型CRISPR系统(SpCas 9)的sgRNA 靶点一般为20nt2)sgRNA序列的碱基组成:基因特异的sgRNA 模板序列位于PAM 序列前,PAM序列的特征为NGG (N可以为任意核苷酸)3)sgRNA的序列应避免以4个以上的T结尾,GC%含量为30%-70%4)sgRNA的序列与On-target和Off-target的匹配数都应尽可能的高。5)
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问
wb出问题了
土井挞克树
可能是非特异性结合,或者你的样品中有蛋白酶
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问
线粒体蛋白提出来就降解可能是什么原因?
土井挞克树
那么就是蛋白质保存的问题,尝试更换保存液
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问
过氧化氢氧化损伤
土井挞克树
细胞密度低的时候不建议这样做,死得太多
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问
求问各位大佬,96孔板培养芽孢杆菌生物膜
土井挞克树
建议不要一个板子,太容易互相污染。
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问
有用过PA棕榈酸诱导c2c12胰岛素抵抗吗?查文献,说的是500-700mM,大家都是怎么做的?
土井挞克树
可以做,建议选择700m,比较好成模。
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问
植物细胞悬浮培养求大佬解答
土井挞克树
有可能是培养温度的影响,尝试改变下
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问
索莱宝的LPS粉末
土井挞克树
最好不要,与试剂要求不一样会影响实验。
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问
请问这是真菌还是死细胞呀?
土井挞克树
看境下影像,像是真菌污染考虑清理。
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问
自己做的兔抗多克隆抗体,在目的条带的位置出现非特异性条带怎么解决
土井挞克树
这样就需要调高筛选精度,尽量把非特异性条带筛选掉
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问
实验设计
土井挞克树
最好是这样,这样严谨一些,看一下蛋白表达
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问
Caco2单层膜建立
土井挞克树
需要检测系数,如果数据可以的条件下可以用。
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问
细胞周期
土井挞克树
吹打时间尝试延长一下,把粘连吹打下
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559 围观
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问
细菌细胞共培养如何做CCK8?
土井挞克树
还是推测是操作中的问题,排除材料的问题可能是时间,温度等影响
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问
脂多糖 caco-2 cck8
土井挞克树
不正常。一般这个浓度已经足够诱导了
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问
MC3t3成骨诱导问题
土井挞克树
一般来说不会的,你重复实验看是否有好转
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问
血液或尿液中造影剂的含量可以测定吗?
土井挞克树
可以的,可以测量半衰期以及清除率等
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问
CHO细胞培养及转染效率低的问题
土井挞克树
实验室微生物系统怎么样,检查一下培养基
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问
qPCR标曲低浓度曲线分不开,模板超声没用
土井挞克树
建议更换引物探针,高重复性容易导致曲线不明显
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719 围观
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问
我细胞状态挺好,但是就是不长并且在瓶子上还死了一些(sf21,悬浮细胞,27℃220rpm培养的)
土井挞克树
可以在显微镜下观察是否有污染,这种情况可能有杂质污染
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