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问
求助,荧光定量无CT值
juyue2010
可能是没有设置,在每一个循环收集一次荧光信号
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问
请问有微量建库的实验细节展示吗?cycle数如何该如何确定?
土井挞克树
我这里有微量建库的实验细节图,分享给你:
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问
有Elispot的实验细节展示吗?视频或是protocol分享
土井挞克树
我有Elispot的实验细节图
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问
免疫共沉淀IgG条带问题
土井挞克树
珠子少加点,wb抗体稀一点,曝光时间短一点。珠子抗体这些不要贪多,不然容易有非特异性
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问
提蛋白不离心会有什么影响?
土井挞克树
提蛋白不离心的话杂质无法与样本分离,可能影响后续试验,比如破裂细胞就无法分离
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问
我要用流式测外泌体上的蛋白marker,一定要用磁珠吗,有没有提供具体的步骤
土井挞克树
磁珠要用的步骤可以参考【1】具体而明确的检测 【2】定量分析,荧光与外植体量之间有很好的相关性。 【3】直接检测细胞培养上清液和生物液中的外泌体。无需分离或沉淀 【4】需要的样品量非常少 【5】灵敏度更高,动态范围更广。即使是少量的样品,也能保证检测结果。 【6】可重复性 【7】允许外泌体捕获细胞群的同时进行免疫表型分析
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问
条带模糊或者出现污斑
申东熙老伯
污斑可能是在转膜前不小心碰到了活化后的膜,被污染了
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问
怎么用琼脂糖凝胶电泳检测trna?
土井挞克树
总rna电泳时,trna的泳动率才与分子量的对数呈线性关系,所以可以通过凝胶电泳检测
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问
D-半乳糖造细胞衰老模型,该用什么溶,是pbs还是DMSO?
土井挞克树
pbs就可以。PBS调成弱酸或者弱碱稍微温热一下就能全溶基本不影响溶解度的。
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问
现在有成熟的从石蜡组织标本中分离细胞上流式的技术吗
Dr_劉医生
大致就是先脱蜡处理,然后复水(这步最关键),解离(胃蛋白酶)、染色;流式中文网有个方案(见图),《石蜡包埋切片制备单细胞悬液的实验步骤》
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问
THP-1细胞构造脓毒症模型能不能直接用lps,不加pma?
土井挞克树
PMA一般用来诱导单核THP-1分化为巨噬细胞样细胞,LPS目的是诱导M1 polarization.,如果你不需要巨噬样细胞可以不加
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问
Meta分析不会收集数据有什么学习方法么
Dr_劉医生
去园子里的循证医学板块多看看,当然也可以看一下网课,学习一下流程,上手了就没多难;数据提取无非就是率的meta还是效应值的meta,
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问
求助幽门螺杆菌造模
Dr_劉医生
确实如此,hp感染本身就是慢性病理改变,hp感染可能不影响肠化生和萎缩的严重程度,所以造模时间和成功率都不高。建议可以问问公司,有没有成熟的技术
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问
BV2细胞形态
whilt-shirt
看图片细胞状态还好,不过可以传代了
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834 围观
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问
蛋白的抗体对抗体的要求
balalaLy
抗体不需要复温,而且需要尽量保持低温
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605 围观
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问
求助 中性粒细胞分离
纵横捭阖DTOU
覆盖在分离液上的时候有没有分层存在,如果有的话考虑可能是小鼠全血太少了,覆盖的时候太快,缓冲进入下层的也会影响结果,就是一定要缓慢,看你的图分层不够干净,有红细胞混杂在上层。
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1483 围观
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问
凝胶层析可以分离血清蛋白吗?
小布丁瑶瑶
可以 首先琼脂糖凝胶可以排除,这是大孔凝胶,用于分子量较大的成分。
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1963 围观
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问
细胞代数靠后会影响实验结果吗
我们会有以后的
时间推移慢慢的,细胞代性和细胞生物学特性都会有影响。
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1169 围观
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问
hepg2细胞堆叠长了形貌发生了好大变化,这是细胞老化了吗?
hy-cell
保证培养基不干的情况下尽可能不动它,让它缓缓,长密点看看状态会不会恢复吧
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问
流式细胞术中出现非特异性染色除了自发荧光之外,还有哪些原因?怎么避免?
elabscience
除此之外,巨噬细胞、单核细胞等表面表达大量的FCR,会与抗体非特异性的结合,因此在对此类含有大量FCR的细胞进行抗体标记前需要先进行封闭。
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