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实验问答

23,916,249 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问求助🆘细胞种板后，想计算细胞培养板里每个孔的细胞数，应该如何操作？

huarenqiang5

计算方法：（4个大正方形内之细胞数目之和×稀释倍数× 104）/4=每 mL 悬液中的细胞数目。

5 回答2024 围观

问求助🆘细胞铺板前进行了计数，根据计数结果进行铺板，之后细胞长满后每孔的细胞数量还用计数吗？

Keven轩

一般不需要了，除非显微镜下明显看出细胞死了很多

8 回答663 围观

问哪位大佬有“吸头规格和移液器量程适配”这块儿的文档或者知识库呀，分享一下，不剩感激

周末也要努力呀

一般来说，吸头的容量应该小于或等于移液器的量程。例如，如果移液器的量程为0.1-1 mL，那么适配的吸头容量应该小于或等于1 mL。如果吸头的容量为2 mL，那么它就不适合与该移液器一起使用。

4 回答688 围观

问该实验中重铬酸钾可以用丙酮代替吗，去除脂肪用？胰蛋白酶过程是否可以通过使用梯度甘油进行透明来代替？

huarenqiang5

可以用丙酮代替重铬酸钾以去除脂肪。

5 回答513 围观

问关于真核胞内表达蛋白的纯化

周末也要努力呀

对于胞内表达的蛋白纯化，可以采用以下步骤：1. 细胞破碎：将表达目标蛋白的细胞收获后，通过超声波破碎或其他方法破碎细胞膜，释放细胞内的蛋白。2. 蛋白提取：使用适当的缓冲液提取蛋白，可以加入一些辅助剂如盐、洗涤剂等，有助于蛋白的溶解和稳定。3. 清除细胞碎片：通过离心或其他方法，将细胞碎片和细胞核等杂质清除，得到较为纯净的蛋白上清。4. 亲和纯化：如果目标蛋白具有特定的结构或功能域，可以利用亲和纯

3 回答2127 围观

问光合测定仪3015D的人使用方法详细步骤

高山云初

1.将主机和手柄用数据线连接起来。打开电源开关,预热5-15分钟,如果环境温度低于25℃,需适当延长预热时间至15分钟左右。2.根据不同植物、不同光合速率在“默认设置参数”内设定不同的测量间隔。3.设置完成后进入测试数据界面,按“气泵”键打开气泵,使手柄叶室内的空气与主机之间进行交换。按下压柄,夹住需要进行测量的叶片。4.夹住叶片后,观察二氧化碳和湿度变化,当二氧化碳变化开始匀速下降、湿度增加时

3 回答1017 围观

问请问一下有人用cd19和cd27分选记忆B细胞的吗？

羽2BRD

你看一下抗体是不是选择种属错了，或者是因为样品的表达水平不够，需要添加诱导剂或者更换更敏感的进口的抗体

3 回答746 围观

问溶血的标本如何做血型鉴定

feixue7758527w

溶血标本好像很难做血型标本的，你可以按照正常程序试试，实在不行就只能再次取血了

4 回答860 围观

问怎么判断基因间的调控是直接还是间接的？需要用什么实验证明？

土井挞克树

可以做对照试验，间接调控设计到多通路的用pulldown看是否存在多通路

3 回答813 围观

问做细胞实验，粉末状vc配制成液体了（已过滤），细胞培养基也过滤了，两者加在一起需要再过滤一次吗？

土井挞克树

一般是不用了，如果有污染就需要再次过滤

3 回答209 围观

问该实验中胰蛋白酶起到什么作用，小鼠的肌肉组织是在哪一步腐蚀掉的，之前尝试做都存在肌肉残留的现象？

feixue7758527w

胰蛋白酶可以部分去除肌肉组织，残留可以用胰蛋白酶反复擦拭或者试试双氧水的应用的

3 回答349 围观

问请问大家给小鼠滴鼻能进气道吗？我的基本都进胃里了，不知道怎么养滴能进气道呢？

feixue7758527w

滴鼻可以进入气道的，小鼠滴鼻子的时候适当刺激一下试试，注意滴鼻子的角度，个人认为稍微快一点还是有效果的。

3 回答671 围观

问请问RNA-seq技术的具体流程是怎样的？有哪些文献可以参考？

huarenqiang5

1. workflow进行差异表达基因分析的前提是，获取代表基因表达水平的矩阵。因此在进行分析前，必须知道基因表达矩阵是如何产生的。在本教程中，将会简要的介绍从原始测序读数到基因表达计数矩阵过程中，所采取的不同步骤。下图是整个分析过程的流程图。2. RNA提取与文库制备在对RNA 进行测序前，必须从细胞环境中提取和分离出RNA 制备成cDNA 文库。下面将介绍涉及的许多步骤，其中还包括了质量检查，

4 回答1159 围观

问如何构建PB转座子介导的外源基因在哺乳动物细胞系中能够稳定表达的载体？哪些文献可以参考并列举？

橙汁儿青柠味

设计引物pcr后，将目的片段通过酶切连接或者同源重组连接到载体上，然后转染细胞后进行药筛即可。

4 回答531 围观

问转录组学分组问题请教

橙汁儿青柠味

只要各组之间至少3个样品就可以满足了

3 回答730 围观

问想问一下，构建含特定RNA序列的质粒与含该RNA表达蛋白序列的质粒，在构建过程中，序列选择有何不同。

周末也要努力呀

在构建含特定RNA序列的质粒和含有该RNA表达蛋白序列的质粒的过程中，序列选择有一些不同之处。1. 含特定RNA序列的质粒：在构建含特定RNA序列的质粒时，需要选择一个适合的载体质粒，该质粒应具有适当的启动子和终止子，以确保RNA序列能够被正确转录和翻译。此外，还需要选择一个合适的选择性标记，如抗生素抗性基因，以便在细胞中筛选和维持质粒。2. 含有该RNA表达蛋白序列的质粒：在构建含有该RNA表达

3 回答441 围观

问circRNA的转录丰度是通过测量什么来得到的呢？

土井挞克树

测序就可以，测序后就能得到circ RNA丰度信息

3 回答294 围观

问菌液植酸酶磷酸酶抑制剂的添加方法

土井挞克树

一般注意添加抑制剂的时机，应该在通路激活之后有阳性反应之后进行抑制

3 回答505 围观

问使用深层多尺度图神经网络筛选药物的蛋白质作用靶点怎么进行预训练呀？

dxy_jgd0jwa6

请参考文章题目为“STRATEGIES FOR PRE-TRAINING GRAPH NEU NETWORKS”.这篇文章中，作者开发了一种新型的GNNs预训练策略。作者的策略成功的关键是将节点级和图级预训练与表现型GNN结合起来考虑。这确保了节点嵌入捕捉到了局部邻域语义，这些语义被汇集到一起以获得有意义的图级表示，反过来，这些表示又被用于下游任务。在多个数据集、不同的下游任务和不同的 GNN 架

4 回答478 围观

问过氧化氢氧化损伤模型？

春风十里WW

请问楼主用过氧化氢建立氧化损伤模型成功了吗？重复性好吗？

6 回答601 围观

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