实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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问尿液中 17-酮类固醇测定实验

周末也要努力呀

这是因为氢氧化钾具有碱性，可以使间二硝基苯发生酸碱反应，生成相应的盐类。这种盐类在显色试剂中具有特定的颜色，可以通过显色来判断尿液中17-酮类固醇的含量。具体的反应机制如下：间二硝基苯 + 氢氧化钾 → 间二硝基苯盐 + 水显色试剂中的间二硝基苯盐具有特定的颜色，可以通过比色法或光度计等方法测定其吸光度，从而间接测定尿液中17-酮类固醇的浓度。

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问腺病毒包装流程、注意事项与常见问题

粥辰辰辰辰

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问请教法夫酵母原生质体转化的具体方法。

周末也要努力呀

1. 制备载体：将目标基因克隆到适当的载体上，例如质粒。2. 转化酵母细胞：将制备好的载体转化入法夫酵母细胞中。有几种常用的方法可以实现转化： - 钙离子法：将法夫酵母细胞与质粒混合，加入含有钙离子的转化缓冲液中，通过热冲击或电击使质粒进入细胞。 - 锂离子法：将法夫酵母细胞与质粒混合，加入含有锂离子的转化缓冲液中，通过热冲击或电击使质粒进入细胞。 - 冻融法：将法夫酵母细

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问DC细胞的抗原提呈实验步骤？

周末也要努力呀

BMDC细胞（骨髓源性树突状细胞）的抗原提呈步骤如下：1. 骨髓细胞分离：从小鼠骨髓中分离出BMDC细胞。2. 培养：将BMDC细胞在培养基中进行培养，以促进其增殖和分化。3. 处理抗原：将目标抗原加入培养基中，使BMDC细胞摄取抗原。4. 抗原处理：BMDC细胞内的抗原被降解成小片段，并与MHC分子结合。5. MHC分子表达：MHC-抗原复合物被转运到BMDC细胞表面，并在细胞膜上表达。6. 抗

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问用于测定水质p的钼酸铵溶液可以保存多久呀

土井挞克树

避光保存最长可以6个月，超过六个月不建议使用

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问求助各位大神，为什么绝大部分的接合实验都用大肠杆菌C600或者J53作为受体菌，是因为它们有什么特殊的性质吗？

周末也要努力呀

大肠杆菌C600和J53是常用的受体菌株，主要有以下几个原因：1. 大肠杆菌C600和J53具有高度的自然转化能力，能够接受外源DNA的转化。这使得它们成为常用的受体菌株，用于接合实验中的DNA传递。2. 抗生素抗性：大肠杆菌C600和J53具有多种抗生素抗性基因，如氨苄青霉素、四环素等。这些抗生素抗性基因可以用作选择标记，通过选择性培养基筛选转化成功的细菌。3. 基因背景清晰：大肠杆菌C600和

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问请问各位前辈做小鼠mcao的时候，颈总动脉结扎什么时候打开，是插完后，还是再灌注时，还是都可以

huarenqiang5

颈总动脉结扎后建议在再灌注时打开比较好。

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问关于转录组与代谢组差异筛选

土井挞克树

一般在样本量不足或者样本量不均等的时候需要调整p值

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问印三酮法测脯氨酸含量中，配置100微克每毫升的脯氨酸溶液制作标准曲线是什么意思？怎么制作

周末也要努力呀

标准曲线是为了后续测出OD值兑换成对应的你需要的组间浓度，标准曲线根据标准液体稀释成不同的浓度梯度制备。后续只需要检测OD值就可以知道浓度了。

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问ris-Glycine凝胶，Bis-Tris(MOPS)凝胶，Bis-Tris(MES)凝胶、在电源时如何选择、他们的原理是什么

土井挞克树

Bis-Tris 类凝胶系统是一种预制聚丙烯酰胺小型凝胶系统，可对非变性蛋白和蛋白复合物进行灵敏的高分辨率分析、分子量估算和纯度评估Bis-Tris 凝胶的工作原理在 SDS-PAGE 中，SDS 充当电荷转移分子，它可以让蛋白带净负电荷，从而使蛋白变性并向阳极迁移。BN PAGE 采用考马斯 G-250 染料作为电荷转移分子，该染料附着在蛋白上使其带净负电荷，同时保持蛋白处于非变性、天然状态。N

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问超速离心提取植物外泌体或细菌外膜囊泡一般用多大转子？

huarenqiang5

4℃、10000 ×g、30 min 离心

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问我要进行大肠杆菌和金黄色葡萄球菌生物膜的抑制情况检测，想用荧光方法来检测生物膜，用什么药剂？

huarenqiang5

可以用六氟磷酸化(E)-4-(2-(5-(7-(4-(二苯胺)苯基)苯并[c][1,2,5]噻二唑-4-基)噻吩-2-基)乙烯基)-1-乙基喹啉（I）。

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问小鼠总是撕咬我好不容易做出来的敷料....

Ckkdien

实验鼠专用伊丽莎白圈啊自己折腾搞不好。网上有视频和产品的，搜搜实验鼠伊丽莎白圈能找到。

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问Western blot出现不规则斑点

huarenqiang5

主要考虑以下几点原因:1.封闭液没有完全溶解。2.封闭液和抗体发生作用。3.hrp偶联二抗有聚集体。4.发生细菌污染。

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问（小白提问）请问对肿瘤细胞系构建过表达和敲低组时，用来对照的OE-NC和si-NC分别进行了什么处理呢？

dxy_mqg1dtg8

你的理解是对的。对于过表达实验，实验组会将目的基因的过表达质粒转染到肿瘤细胞系中，而OE-NC组则是将空质粒转染到肿瘤细胞系中作为对照。因为空质粒不会对目的基因表达产生影响，所以OE-NC组可以作为背景噪音的对照。对于敲低实验，实验组会使用siRNA转染将目的基因敲低，而对照组则会使用阴性对照siRNA转染，通常选择与目的siRNA序列无关的、不会对目标基因表达产生影响的siRNA作为阴性对照。这

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问请问这是什么细胞污染啊？培养基有一点点混浊

huarenqiang5

从图片上看是黑胶虫污染了，建议及时处理一下。

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问pcr产物送测序DNA有要求吗

此用户已注销

DNA浓度没有到50可以的，但是不能太低

5 回答1980 围观

问PEDV一种病毒，大家是怎么分离的呀，求救

dxy_mqg1dtg8

PEDV（猪流行性腹泻病毒）的分离通常涉及到以下步骤：1. 采集病毒样本：从猪体内的粪便、肠道、血液等样本中采集病毒样本。2. 病毒富集：将采集到的样本进行离心、过滤、超速离心等操作，以富集病毒。3. 细胞培养：将病毒样本接种到感受器细胞上进行培养，例如Vero细胞、PK-15细胞、LLC-PK1细胞等。4. 病毒分离：观察细胞的形态变化、病毒感染的效果等，通过形态学和免疫学等方法进行初步鉴定，筛

3 回答1034 围观

问求助痛风性关节炎造模尿酸钠的配置方法

dxy_s6qz7bg9

您好，我想询问一下您是造动物模型还是细胞模型？最终用尿酸钠溶液造模效果如何？

3 回答491 围观

问采用MSU诱导THP-1细胞2h的MAPK信号通路空白组P-P38值过高是什么原因呀

dxy_s6qz7bg9

您好，请问用MSU刺激细胞造模是用混悬液还是用氢氧化钠溶成溶液进行刺激呢？

3 回答438 围观

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