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        单酶切为何出现两条带?

        相关实验:酶切实验

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        给我跑条正常带吧

        求助各位大佬 看看是什么原因 我用的载体是PGM-T 目的基因是1300bp左右 用的SacII (TaKaRa的)该载体也仅存在一个对应的酶切位点 理论上切出来的结果应该是4000+bp 可跑出来两个条带 大小也没对应上 用的5000marker 反应体系按照说明书加 37℃切了一个小时 图片描述




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        4 个回答

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        huarenqiang5

        有帮助

        可能是质粒仅有单酶切的一个位点,部分酶切了,部分没有酶切,酶切的是多数,所以产生条带较大(也就是浓度的不同)。但是完整的质粒和酶切后的质粒条带因为结构关系应该不会很近。可以看哈是不是电泳的时间不够。

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        高山云初

        有帮助

        如果是单酶切,在电泳结果中通常会出现2条带。这是因为单酶切只会剪切DNA的一个特定位点,因此产生的DNA片段是固定的大小。在电泳过程中,这些片段会在凝胶中移动,从而形成两个大小不同的带。

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        此用户已注销

        有帮助

        单酶切电泳结果中通常只会出现2条带。这是因为单酶切只会剪切DNA的一个特定位点,因此产生的DNA片段是固定的大小。在电泳过程中,这些片段会在凝胶中移动,从而形成两个大小不同的带。如果有多个酶切位点,则会出现更多的带。

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        周末也要努力呀

        有帮助

        出现两条带的情况可能有以下几种原因:


        1. 酶切位点的变异:酶切位点可能存在变异,导致酶切产物的长度不同。这种情况下,可能会出现两条不同大小的酶切产物。


        2. 酶切位点的修饰:酶切位点可能被DNA上的甲基化等修饰作用所影响,导致酶切酶无法正常切割。这种情况下,可能会出现一条完全切割的酶切产物和一条未切割的酶切产物。


        3. 酶切产物的结构:酶切产物可能存在某种结构,例如环状DNA或二聚体等,导致在电泳过程中出现两条带。这种情况下,两条带可能具有不同的迁移速率。



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