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问
收样一定要用去酶离心管吗
土井挞克树
普通离心管中可能有物质颗粒对样品产生污染。
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问
WB有内参没目的会是蛋白降解吗?
申东熙老伯
蛋白降解的话内参应该也跑不出来,单纯降解目的条带的情况有点罕见,更考虑是蛋白样品存放和实验操作的问题。
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问
BSA和遗传图谱的对比,各优缺点
huarenqiang5
BSA相比于利用遗传图QTL定位,BSA分析是一种简便又高效的分析定位方法。
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问
PT和PCT有啥区别?
徐彩云6
PT即凝血酶原时间是评估凝血功能的指标。PCT即降钙素原主要用于细菌感染的分析。
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问
FCM检测过程中如何调节补偿?
huarenqiang5
补偿时先测定一种染料的荧光,此时除了应该接收该荧光的光电倍增管 PMT 1 有信号输出外,另一光电倍增管 PMT 2 也常会有微弱输出。调节 补偿器使 PMT 2 的输出为 0 ;然后再测另一种波长的荧光染料,调 PMT 1 的补偿器使之输出也为 0 ;然后再测另一种波长的荧光的染料,调 PMT 1 的补偿器使之输出也为 0 :如此反复调节 ,使两种荧光的探测器都获得补偿。实际调节 时用的是一种标
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问
流式中检测细胞实验过程中,怎么确定你所检测的组织上是否表达该抗原?
huarenqiang5
1.用6孔板培养细胞,待细胞生长达到60%-70%,弃掉旧培养基。收集对应细胞培养基到一离心管内备用。2.用0.25%胰酶消化细胞,至细胞变圆,加入前面收集的细胞培养基,吹打下所有的贴壁细胞,并轻轻吹散细胞,收集到离心管内(注意:悬浮细胞不需要胰酶消化,直接收集到离心管即可)。3.200g离心5min,沉淀细胞。对于特定的细胞,如果细胞沉淀不充分,可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。4.小心吸去
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问
为什么跑胶的地方会有臭味?有毒吗?
huarenqiang5
如果是跑核酸电泳且有刺激性气味,应该就是TAE buffer,主要气味源是醋酸(适量无害);如果是跑蛋白PAGE电泳且有刺激性气味,应该就是脱色液,主要气味源是醋酸(适量无害);或者是配胶用TEMED(很强的神经毒素),这个需要小心!其实分子生化实验室的挥发性刺激性试剂不算太多,只要不过量的话对人体伤害应该也不大,至于怎么清理,只能通风了。不过更重要的还是要找到气味的来源,说不准是打翻了什么试剂没
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问
组织芯片出现脱片,是因为脱蜡不完全吗
土井挞克树
和脱蜡有一定关系,可以在做芯片前先将蜡块切片贴在防脱胶载玻片上,再进行操作
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问
煮散在煎煮过程中易出现糊锅现象,含挥发性成分的煮散药材在贮存过程中也存在成分易损失等问题,上述问题如何解决。
徐彩云6
一般先用冷水浸泡约半小时左右,先用大火煎开再用小火熬15-30分钟,在熬的过程中可以搅动药物防止黏锅而出现糊锅
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问
GraphPad Prism作图
wildC8OG
也可直接复制,粘贴成为prism 可编辑的图
4 回答
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问
WB背景较深,非特异性杂带很多,科研小白求助各位大神!
wildC8OG
延长封闭时间,降低一抗浓度,增加二抗浓度
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问
核酸外切酶
huarenqiang5
核酸酶P1催化单链的核酸,需要在45-75摄氏度时有催化活性,PH一般在5-8时有较强的活性,活性与溶液中的离子种类、离子强度有关,同时也因底物而异。
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429 围观
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问
肿瘤病理免疫组化有统一标准吗?
drhyg2005
有些指南要求病理报告单的内容和规范。
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680 围观
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问
【求助】神经干细胞培养一定要加EGF吗?
土井挞克树
EGF并不是唯一必须的。除了 EGF 外,还需要 bFGFo Carpenter 等在含 EGF、bFGF 和 LIF 的无血清培养基中培养的人类神经干细胞,能存活达1年以上,并仍然保持其分化潜能。
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问
请问小鼠取肝肺需要禁食12h吗
wildC8OG
需要禁食禁水,避免食欲影响实验结果
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问
流式细胞仪上的FL2-W FL2-A FL2-H 分别是做什么的?
elabscience
理想状态下,细胞是一个一个通过流式细胞仪激光照射区的。细胞通过激光照射区所产生的荧光信号被PMT接收,转化成电脉冲信号,如图所示:从细胞进入激光照射区到离开,电脉冲信号由0到达峰值,再降回0,被记录为一个峰值。H是脉冲高度,代表脉冲信号的峰值,W是脉冲宽度,是指细胞通过激光照射区域的时间,A是脉冲信号的面积。
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问
想问问鬼笔环肽染色图和DAPI结果图怎么分析,谢谢!
balalaLy
这得看你染phalloidin的目的是什么,如果是要看细胞的形态结构变化,可以通过对比观察微丝的排列以及数量进行分析和描述。
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问
请问流式测凋亡,染色完上机前,还需要清洗吗
elabscience
这需要看你具体用哪种方法检测凋亡。如果是Annexin V双染法,目前主流厂家的试剂盒在染色后都是不需清洗的,可直接上机。即使一定要清洗,也应使用Annexin V配套的binding buffer进行清洗。
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问
磁珠分选和流式细胞仪分选的结果有什么不同,侧重点是哪里?
elabscience
流式分选可同时针对多个指标进行分选,分选速度快、纯度高,但相较于磁珠分选,对细胞造成的损伤会更大;磁珠分选对细胞状态保护较好,但通常一次只能针对一个指标分选,且纯度也不如流式分选高。
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问
流式细胞术可以检测细胞的哪些指标?
elabscience
流式细胞术检测指标如下图所示:
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