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        LPS刺激THP-1,炎症模型一直建不起来,求助🆘

        相关实验:体内活化巨噬细胞

        user-title

        科研菜鸟米雪

        求助各位大神,我用PMA100nM,48小时把THP-1分化成巨噬细胞,再用LPS1ug/ml刺激THP-1,3小时,做了ELISA,炎症还挺明显的,但是做WB没趋势,甚至炎症组比对照组还低了,是什么原因呀?怎么改进呢?

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        2 个回答

        user-title

        huarenqiang5

        有帮助

        个人感觉THP-1细胞比较敏感,容易受到外界的刺激,即使是更换血清和1640培养基的品牌也需要一周左右时间适应,有时可能会出现自动贴壁的情况。推荐使用进口血清和进口1640,且细胞适应后不要随意更换。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        WB测不出来的话,建议你提RNA,逆转,qPCR检测一下这个iNOS 有没有变化。如果iNOS没有上调,很有可能是激活失败,如果iNOS上调了,可以考虑NO检测的问题。

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