求助人Th17细胞的诱导

1、建议用Th1/Th2/Treg/Th17体外诱导分化，对于48孔板，每孔加入0.5ml细胞悬液（即0.5×10E6细胞）。对于24孔板，每孔加入1ml细胞悬液（即1×10E6细胞）。

2、如果测试诸如药物之类的因素的影响，则根据实验，在分化过程之前，期间或之后将测试物质添加到相应的孔中。接下来，在培养基中加入相应量的细胞因子进行诱导。Th0：30U/ml hIL-2。Th1：15ng/ml rmIL-12、30U/ml hIL-2、5000ng/ml IL-4（克隆号11B11）。Th2：10ng/ml rmIL-4、30U/ml hIL-2、2000ng/ml可溶性CD28（克隆号37.51）、5000ng/ml IFN-g（克隆号XMG1.2）。iTreg：15ng /ml hTGFβ、30U/ml hIL-2、5000ng/ml IFN-g（克隆号XMG1.2）、5000ng/mlIL-4（克隆号11B11）。Th17：20ng/ml rmIL-6、3ng/ml hTGFβ、5000ng/ml IFN-g（克隆号XMG1.2）、5000ng/mlIL-4（克隆号11B11）。

给予CD3及CD28抗体刺激后在培养体系中加入白细胞介素6及转化生长因子β,试一下。