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问
重叠pcr连接长片段(7kb左右)一直做不出来 有没有大佬可以请教一下
土井挞克树
在做重叠延伸PCR时,要注意一个关键的问题,如果你用Taq酶话,会在扩增产物的3‘端多一个A尾,如果你其他条件都没问题的话,就要考虑一下是不是这个A尾影响了碱基配对的问题,可以换用平末端酶(如pfu酶)一试。
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问
请问一下写了一篇心肌梗死合并糖尿病病例报道发表哪个杂志好些?
徐彩云6
可以投《中华心血管病杂志》试一下
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问
wb条带位置在组织和细胞不一致,按照说明细胞是正确的,但是组织特异性很好,自动曝光的话条带就这一条,有没有哪位前辈知道原因?可否
huarenqiang5
你这个主要原因考虑是样品本身问题
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问
为什么我的小肠隐窝消化不下来?
土井挞克树
用镊子挑完后用pbs清洗,然后延长edta作用时间
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问
想求助一下,有没有能测出少量组织中氟离子浓度的方法?
土井挞克树
可以做荧光分析,这种方法灵敏度高。
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问
WB实验背景不干净,条带也很浅
申东熙老伯
背景不干净一是封闭二是抗体浓度,封闭两个小时没有问题,一抗浓度太高了,可以1:4000或者1:5000稀释。
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问
细胞缺氧糖的模型组用MEM EARLE‘S还是MEMA,或者应该用下图哪种基培,求指教
huarenqiang5
一般情况都用MEM EARLE‘S,
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问
请问激素依赖性的前列腺癌细胞有哪些呢?
huarenqiang5
激素依赖性前列腺癌细胞有LNCaP细胞系,这种类型的癌细胞,遗传几率是非常高。
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问
请问如何分辨某种未知的塑料颗粒?
土井挞克树
做密度实验,烧灼实验,和化学实验来验证。
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问
如何判断外源基因走向以及原理是什么求
土井挞克树
是以总RNA或mRNA为模板进行反转录,然后再经PCR扩增。如果从细胞总RNA提取物中得到特异的cDNA扩增条带,则表明外源基因实现了转录。
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问
pcr 引物一般加多少pmol 模板又加多少量呢
huarenqiang5
引物0.1~1umol(10~100pmol),量以浓度为0.1到0.5μM进行计算。
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问
NCBI上小鼠瘦素全长mRNA的GenBanK格式页面
土井挞克树
1、进入NCBI主页,在下拉框中选择GENE,然后输入p53,点击进入,出现摘要页面,选择物种Mus musculus(在右边物种栏),更新摘要页面,选择你想要的基因,点击后进入基因的报告页面,点击右侧的reference sequence,下拉找到genomic sequence 点击genbank链接,进入该基因的序列描述页面,找到CDS选项,就是这个基因的编码全长序列。2、或者,进入NCBI
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问
植物亚细胞定位,如果推测在细胞质内应该选什么maerker,有结果图片更好
土井挞克树
植物细胞比较复杂,需要经过严密的选择亚细胞定位预测工具来选择marker,推荐cNLS Mapper 定位信号预测工具
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问
以同等刺激强度,在心缩期给予心室一次刺激,观察心跳曲线是否发生变化。增加刺激强度,在心缩期再给予一次刺激会有什么结果?为什么?
汤姆卜丽波
整个心脏收缩期内,由于处于不应期,任何强度的刺激都不能使心肌产生扩布性兴奋。心肌的这一特性具有重要意义,它使心肌不能产生象骨骼肌那样的强直收缩,始终保持着收缩与舒张交替的节律性活动,这样心脏的充盈和射血才可能进行。
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问
求帮助,EMSA结果分析
huarenqiang5
主要从以下几点考虑:1、是否是蛋白上样浓度不够?2、探针应保存在-20℃以防止降解。3、探针应避免多次冻融。
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问
求助|心脏灌注不净怎么办
bamboopiggy
这个带血的脑是不能用了,多练练吧,带血的脑,作免疫组化影响很大
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问
友友们,求助!!
bamboopiggy
你的kit在保质期吗?你买的蛋白和你用的kit的种属是一样的吗?你有阳参吗?
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问
实验问题
Anna2401
是的,CD4+T细胞又称辅助T细胞,能辅助CD8+T细胞参与细胞免疫杀伤,同时还能清除肿瘤细胞,或病毒感染细胞,还可辅助B细胞参与体液免疫
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问
求ATP的检测方法汇总。
且行且尽力
层析法:利用样品各组分之间亲和力、分配系数等化学性质的差异,实现ATP与其它杂质的分离。1) 纸层析法:是检测核苷酸含量的常用方法之一。该方法常以异丙醇、浓氨水和水按7:1:2的混合作为展开剂。2) 薄层层析法:该方法纸层析法原理基本相同,也是检测核苷酸含量的常用方法之一,其常用的展开剂是正丁醇、丙酮、冰乙酸、氨水、水按7:5:3:3:2的比例混合而成。3) 离子交换色谱法:利用样品各组分离子交换
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问
PCR和western blot差异表达求助
genecreate
q PCR和WB不一致的现象很常见。mRNA到蛋白质之间有多个调控环节
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