实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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细胞

问吉姆萨染色如何做出可以进行核型分析的片子

粥辰辰辰辰

实验当天保证细胞处于对数生长期，一般一个6cm的培养皿80%的密度能做一次实验。b. 将待测细胞从37℃，5%CO2培养箱中拿出，添加秋水仙素（终浓度为0.2ug/ml），摇匀后37℃孵育1-2小时。c. 等待的同时，配制低渗溶液0.075M KCL(配制:8ml无菌水+44.7mg KCL)，放入37℃水浴预热。d. 孵育后的细胞用胰酶消化，1200转/分，离心5min，收集于离心管中，去除上清

3 回答476 围观

问磨脾脏过细胞筛，制备单细胞悬液，加入红细胞裂解液后离心，沉淀中总是带有黑色，求问，这是什么原因

周末也要努力呀

组织提取时候没有洗干净，PBS多涮洗几次

4 回答698 围观

问华尔纳生物的细胞怎么样啊

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蛮好的，华尔纳生物（WarnerBio）引进及构建生产的原代细胞与细胞系，均经过严格的质量把控和鉴定认证，确保其保持良好的生长特性、稳定性和可重复性

6 回答548 围观

问求助🆘有浓度为5mM的染料溶液1ml，想得到终浓度为200uM的染料溶液5ml，应该取多少原溶液？

周末也要努力呀

从5豪摩尔到200微摩尔，相当于稀释25倍。想要得到5毫升，那就除以25，也就是取200微升即可

4 回答405 围观

问基因敲除小鼠多代近交只能获得纯和胚胎，无法获得存活纯合子小鼠，为什么？

周末也要努力呀

可以从以下几个原因考虑：1. 基因敲除对小鼠的生存和发育造成了严重的影响，可能导致小鼠的生理功能受损，甚至导致胚胎发育异常，使得存活纯合子小鼠的出生率极低。2. 基因敲除导致小鼠的生殖能力下降：基因敲除可能会影响小鼠的生殖细胞发育和功能，导致纯合子小鼠的生殖能力下降，无法正常繁殖后代。3. 基因敲除引起的遗传背景效应：基因敲除可能会对小鼠的遗传背景产生影响，导致纯合子小鼠的遗传背景与野生型小鼠有所

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问想问一下大佬们，我在用戊二醛和丙酮，两步去溶剂法制备明胶纳米颗粒时，制备后的溶液有很多胶状的东西沉在底部是正常的吗？

秋秋欣欣

是正常的，是一些比较大的颗粒，后续需要丢弃

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问请问在蛋白两端添加avi标签的个数有限制吗？

huarenqiang5

Avi-Tag：是一个15个氨基酸的短肽，具有一个单生物素化赖氨酸位点，与已知天然可生物素化序列完全不同，可以加在目标蛋白的N端和C端。融合表达后，可被生物素连接酶生物素化，为了纯化重组蛋白选用低亲和性的单体抗生物素蛋白或抗生物素蛋白衍生物，除了用于蛋白质分离纯化，还用于蛋白质相互作用研究。特点：1. 无论在体外或者体内，几乎所有的蛋白都可以在一个独特的Avi Tag位点轻易且有效地被生物素化；2

7 回答398 围观

问4T1细胞，容易连着生长，有什么好的解决办法吗？这是60倍镜的明场细胞图

huarenqiang5

1.建议分次消化。一次消化至有细胞移动漂浮时终止，再进行二次消化剩余的细胞，尽量消化成单颗细胞，4T1细胞传代第二天有少量细胞团贴壁未展开为正常现象，继续培养细胞会展开； 2.有可能是细胞密度过大，可通过降低传代密度来改善。

6 回答591 围观

问单酶切为何出现两条带？

周末也要努力呀

出现两条带的情况可能有以下几种原因：1. 酶切位点的变异：酶切位点可能存在变异，导致酶切产物的长度不同。这种情况下，可能会出现两条不同大小的酶切产物。2. 酶切位点的修饰：酶切位点可能被DNA上的甲基化等修饰作用所影响，导致酶切酶无法正常切割。这种情况下，可能会出现一条完全切割的酶切产物和一条未切割的酶切产物。3. 酶切产物的结构：酶切产物可能存在某种结构，例如环状DNA或二聚体等，导致在电泳过程

4 回答5402 围观

问加尾法miRNA跑PCR，CT值始终大于30

土井挞克树

是的，表达太低的话稀释多少倍区别不大

3 回答406 围观

问为什么我用丙酮做明胶纳米颗粒时，溶液颜色是黄色而不是粉红色？

土井挞克树

因为没有避光，吸收了光中的可见光的缘故

3 回答544 围观

问质粒酶切连接产物的核酸电泳分析

土井挞克树

虽然有菌落，但是可能是菌落存在假阳性的问题，或者是存在污染，建议重新换个菌落做

3 回答839 围观

问组织免疫组化实验组和对照组是否需要切片的同一个部位进行观察？还是也不一定。如何选择观察的视野呢

秋秋欣欣

不是说同一个部位，是有对照意义的部位，有可能是同一个部位，也可能是临近部位

4 回答395 围观

问关于这个实验条带结果，请问如何看图呢？

秋秋欣欣

是的，需要做统计学分析，直接对比的话意义不大

3 回答384 围观

问cDNA与基因组DNA有什么区别呢

Keven轩

cDNA一般是指mRNA逆转录并且复制之后的dsDNA，不含有内含子和终止子等。而基因组DNA可以理解为完整的DNA序列，具有生物全部的遗传信息

6 回答3043 围观

问磷的标准测定里，磷酸二氢钾为什么需要干燥，不干燥可以吗，看有些人做不用干燥

feixue7758527w

这个还是要干燥的，否则很容易变质的，变成水合物，影响实验。有的人只不过没有写罢了，估计还是干燥过的z

5 回答787 围观

问[求助]小鼠取肾组织后，固定24h后，应该如何保存？

feixue7758527w

如果是石蜡固定，常温保存就可以了，不要太热。如果是冰冻切片，就要低温保存的。

4 回答1146 围观

问抗体在室温放置了差不多24小时，还能用吗？

路明非AGXC

基本没有影响，可以查看一下该抗体37℃的稳定性实验。

8 回答7855 围观

问请问各位大佬们，背景很脏有可能是什么原因？

路明非AGXC

更改一下封闭条件，试一下4℃封闭过夜。

5 回答383 围观

问UUO小鼠模型

Shadow25

您好，我现在也遇到了同样的问题，请问您解决了吗？

4 回答1023 围观

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