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        如果做多重免疫荧光染色,有两个抗体都是抗兔的,结合二抗之后是不是没办法分开这两个抗体标记的蛋白呀?😭

        相关实验:免疫荧光技术

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        cherub_ann

        目前能找到的这两个蛋白的抗体都只有抗兔的😭

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        4 个回答

        user-title

        dxy_twhuus49

        有帮助

        您好,请问你解决了这个问题吗😭

        user-title

        z流沙z

        有帮助

        对,这样说不行的,需要两个不同种属的

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        如果你使用的两个一抗都是兔源的,并且使用相同的二抗进行检测,那么在多重免疫荧光染色的过程中,这两个抗体标记的蛋白可能会出现重叠,导致无法区分它们。

        但是,你可以通过以下几种方法来区分这两个抗体标记的蛋白:

        选择不同的荧光二抗:如果你的一抗都是兔源的,你可以使用不同的荧光二抗,比如使用抗兔IgG的荧光二抗和抗小鼠IgG的荧光二抗来标记不同的一抗。

        相间分区染色:将细胞分成几个区域,在不同的区域分别使用不同的一抗和荧光二抗进行染色,然后观察不同区域的荧光信号,从而确定不同的抗体标记的蛋白。

        串行染色:先使用一个一抗和荧光二抗进行染色,然后将这个荧光标记的蛋白解离,并用另一个一抗和荧光二抗进行染色,再次观察荧光信号,从而确定两个不同的抗体标记的蛋白。

        总之,尽管使用两个兔源的抗体可能会造成染色信号的重叠,但你可以通过多种方法来区分这些信号,从而达到分别检测不同抗体标记的蛋白的目的。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        是的,所以建议选择不同种属的抗体来进行孵育

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