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问
实验小白,想请问一下细胞分泌的炎症因子,本质上也为蛋白,可以用来跑WB吗?为什么一般都用Elisa 检测的细胞上清液中的炎症因子
Dr_劉医生
本质原理上elisa和WB都可以,但炎症因子作为蛋白质,存在浓度级的问题,太低了根本检测不到,或者不能真实反映;首先,ELISA抗原抗体都能检测,而WB主要检测的就是抗原。对于ELISA主要的特点就是,使用的抗原或抗体是与某种酶连接成的酶标抗原或抗体,由于酶的催化效率很高,可以放大反应效果,增大检测的灵敏度,因此ELISA的检测限可以达到ng级,但WB显色敏感度一般在pg级。
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问
stata导出联赛表时,提示某个变量找不到,无法产生新变量应该怎么办?
Dr_劉医生
亲身经历,做联赛表时,命令正确的前提下,治疗措施的名字不宜过于复杂,取2-3个字母就行;比如,图中你分析的第一个药物是roxadustat,写成ROX就行。
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问
spss数据缺失值处理
Dr_劉医生
确实,缺失值对t检验不影响趋势;但你缺失值达18%,那就没有必要插补了,超过10%的话,插补缺失值就会有统计学问题,后续cox回归也不用补,直接改成NA。
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问
中华肿瘤防治杂志投稿
Dr_劉医生
应该是快了,初审只要送了一般会提前发稿费邮件通知你
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问
有老师了解GSCF的么
Dr_劉医生
大概率是广告邮件,confirm邮件得自己先注册,你自己都不知道什么是GSCF,所以肯定不是你自己注册的,也就不存在confirm
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问
合适的理论模型如何找
Dr_劉医生
在pubmed数据库上检索"心理学"、“模型”、“心理护理”等关键字就可以,
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问
多聚赖氨酸处理的玻片能反复用吗
Dr_劉医生
可以反复用,做好玻片处理就行:玻片处理:1.灭菌水稀释聚赖氨酸溶液,一般的使用浓度为0.01%。2.将玻片浸在稀释的多聚赖氨酸溶液5分钟。注意增加时间不会提高包被效果。3.在60℃烘箱1小时干燥,或室温18-26℃过夜干燥待用。
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问
RAW264.7用RANKL诱导破骨细胞的问题
Dr_劉医生
普遍现象,总结经验和文献后可能原因有2个:一是选择RANKL最好是对应RAW细胞株的,鼠源还是人源。二是RANKLE浓度一般是50ng/ml,而且是自身浓度,不是培养基稀释后的浓度。
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问
为什么氧嗪酸钾腹腔注射后尿酸没有升高?
Dr_劉医生
这个问题有文献讨论过,氧嗪酸钾的效果很短,模型维持时间就1-2小时,所以给药和采血检测时间都得尽快完成
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问
共聚焦实验怎么选染料?
Dr_劉医生
由于共聚焦显微镜是以单一波长的激光作为光源,因此在选择荧光染料时要根据共聚焦显微镜配备的激光器波长选择,如果在同一样品中有多种荧光染料标记,还要考虑它们的发射波长尽量不要重叠,避免串色问题。
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问
做甲基红试验和VP试验测的结果都是阳性,为什么vp试验不是阴性?
Dr_劉医生
一般甲基红和VP实验的结果是相反的。但如果被检菌能一直分解葡萄糖生成丙酮酸,可能会出现例外,二者都是阳性的结果。
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问
细胞缺氧复氧问题,感谢大神指点
Dr_劉医生
细胞缺氧小室换气一般10min就可以了,具体缺氧和复氧的操作可以参考下图:
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问
求助|关于12孔板加药
Dr_劉医生
400ul都到头了,一般12孔板是100-200ul就够了,可以把浓度提高。
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问
做mtt实验接种96孔板,部分孔被污染,这是什么污染呢?像是细长状的虫子游来游去。
Dr_劉医生
可以试试加DMSO,这块板肯定不能用了,细长物质会影响吸光度的检测,后续镜下拍照根本看不清;
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问
细胞拉丝很快飘
Dr_劉医生
细胞没长好和出现拉丝,其实都是一个原因:接种密度太低,会导致细胞长不起来;稀疏时,细胞两级朝向不规律,细胞就会逐渐伸长,出现拉丝。
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问
3T3-L1前脂肪细胞诱导液储存
Dr_劉医生
问题不大,解冻就能用,而且一般是使用前再进行除菌操作。
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问
求助,细胞培养传代,发现有这类东西,肉眼能看到培养液中有一点絮状物
Dr_劉医生
不是真菌,首先并没有成菌落形态,而且镜下看更像是杂质污染
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问
A549细胞形态
Dr_劉医生
肺组织的A549细胞株,镜下透明状是正常状态,除非镜下见到黑色细砂状的物质,才考虑是污染。
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问
细胞线粒体定位通透液选择
Dr_劉医生
细胞线粒体定位通透液可以试试健那绿;一般步骤是先染色线粒体,再进行通透实验
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问
微管在高钙低镁情况下倾向于聚合为什么要使用EGTA去螯合钙离子呢?
土井挞克树
钙离子抑制微管聚合,对微管解聚有促进作用,因而,在微管相关的实验中,都要加入EGTA来特异性的螯合反应体系中可能含有的钙离子。
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