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痛风模型
Dr_劉医生
大鼠痛风性关节炎模型制备方法为:将实验大鼠仰卧固定,以碘伏消毒右后肢距小腿关节,注射器从右后脚的右踝关节外侧与胫骨呈 45 度角插入踝关节腔内,每只注射 MSU 晶体悬液 0.2 ml(25 mg/ml),对照组注射 0.2 mL 生理盐水。
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问
分子对接
Dr_劉医生
用刚性对接,适用于一般大分子蛋白和酶
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问
酶学性质考察 粗酶液的比活力为1.84U/mg蛋白 纯酶液的比活力为1.885U/mg蛋白
Dr_劉医生
需要用纯酶再做一遍酶学性质,二者活力相当只能说明后续反应可能一样,但粗酶液有杂质和化合物的存在,会影响检测结果。
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问
请教pcr问题
Dr_劉医生
高标准差就是阈值,RT-qPCR的阈值就是指基线标准差的10倍。
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问
细胞免疫组化
土井挞克树
二抗的稀释可以参考一抗的浓度,结合后无过多多余的二抗就行
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问
雷帕霉素体外实验用量
huarenqiang5
负荷量为6mg,维持量为2mg/天。
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问
求助求助
Dr_劉医生
还可以检测表达调控和蛋白表达,具体可以参考这篇综述文章
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问
体外刺激小鼠脾脏B细胞
Dr_劉医生
会影响,首先烈红不能完全去除红细胞,其次红细胞裂解液会对白细胞膜有一定的影响,可能会造成细胞膜表面抗原的丢失。
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问
制备感受态一定要从挑单菌开始吗?
huarenqiang5
感受态制备时不是一定要挑单菌落,可以在活化好的平板上划一条线挑菌去小摇。操作时只要保证无菌就可以。另外,补充二楼的转化后挑菌:一定要挑单菌落,而且要利索,不能沾到周围培养基上的空白地方,因为如果不小心碰到,上面有很多连接产物及片段会随着进一步划线在新的培养基上积累,如果用pcr去筛选阳性,会有很多假阳性的。
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问
DMSO诱导分化中性粒细胞
Dr_劉医生
应该是DMSO浓度高了,试试终浓度1%的DMSO诱导刺激,这篇文章方法学部分讲的很清楚。
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问
盲肠结扎穿孔造脓毒症模型
土井挞克树
需要的,不结扎肠道无法坏死,模型不成功
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问
酶连接过程中,打开了PCR仪机盖会怎么样
土井挞克树
只是打开的外机器盖子影响不大,小心污染问题
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问
法夫酵母能用抗生素zeocin筛选吗
土井挞克树
不可以,法夫酵母在zeocin存在的条件下依旧可以生存
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问
免疫共沉淀实验可以确定蛋白之间的结合是直接还是间接的吗?
Dr_劉医生
不可以的,GST pull down实验才能明确直接还是间接。免疫共沉淀主要是通过目的蛋白抗体共沉淀下来的是一个蛋白复合物,而不仅仅是和目的蛋白直接相互作用的蛋白。而GST-Pull down实验可以通过体外实验条件,去除其它蛋白的影响,从而确定目的蛋白和待检测蛋白是否可以发生直接相互作用。
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问
在质粒DNA提取实验结果中出现 A230为负数,A260/A280=3点多 有可能是什么原因?
土井挞克树
质粒提取的不够纯,有其他物质在干扰就会这样
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问
draft Returned by Editorial Office是拒稿吗?
土井挞克树
不是拒稿,你联系编辑部,按要求做就可以
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问
脂质纳米粒细胞实验求助
Dr_劉医生
细胞破裂物质和后期转染不是一回事,前面的细胞破裂物质其实是正常现象:脂质纳米颗粒由脂质组成,在酸度的作用下改变其特性。这一特点使它们能够在细胞外保持完整,但一旦进入细胞,它们就会破裂,释放出它们的内含物。
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问
求助🆘大佬,分选小鼠肠道淋巴细胞试剂盒好用还是胶原酶好用?
康复Victor
如果是分选小鼠肠道淋巴细胞试剂盒感觉更好一点点,没有的话胶原酶也可以
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问
PCR扩增产物在凝胶中涂布或成片状条带弥散
genecreate
可能是引物不好,希望可以帮到您!
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问
事先没有设计酶切位点,想把4500bp的片段连接T载体,适合吗
土井挞克树
可以用重组质粒转,成功率相对大一些。
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