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问
体外细胞培养,培养基加补体C3干预可以转化为C3a和C3b么,怎么实现?
土井挞克树
要想发生转化可以加分解酶催化。
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问
PCR实验室出现污染怎么处理?
juyue2010
全面的紫外照射,过氧化氢消杀,还有核酸消除试剂处理
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问
请问在加qPCR样的时候,反向吸排(先按到移液枪第二档再在加样时每次加到第一档)会更精确吗?有试过的小伙伴吗?
土井挞克树
会更加准确,反向吸排可以减少误差。
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问
溶解曲线出现杂峰的可能原因是什么?有哪些对应的解决办法?
dxyc42u
一般是出现引物二聚体,除此之外就要考虑及时更换试剂盒,
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问
在哪些情况下,PCR反应体系内的DNA浓度和纯度需要检测?
dxyc42u
一般做pcr都需要检测,这样才能保证要p的DNA质量,不然对结果影响大
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问
请问退火温度如何选择?
huarenqiang5
55℃为选择最适退火温度的起点较为理想。
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问
在PCR技术操作中,是否需要能量,需向溶液中加ATP吗?
丁香52
不需要,能量来自外界加热PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成
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问
出现非特异性扩增带怎么办?
dxyc42u
1 提高退火温度;2 如果你的非特异袋较大,那么减少延伸时间,用15-20S试试;3 换引物,找到更特异的引物;
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问
怎样检测引物是否合成的好?
dxyc42u
一般按如下条件检测a溶解曲线单峰,窄而尖,否则可能有非特异性扩增;峰的位置横坐标一般在80度以上,这个温度为pcr产物的解链温度,如果在75度附近,可能是引物二聚体,mirna染料法检测时,溶解曲线的峰的位置可能在75度附件b琼脂糖电泳为明亮的一条带,条带一般在100bp以上,如果设计引物时pcr产物在100bp一下,需要仔细辨认是否为引物二聚体;引物二聚体的条带一般在50bp左右,条带弥散,暗。
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问
实验室的静电防护有简单有效的方法吗?
paj12345
不穿带绒,麻质的织物进实验室,静电是摩擦引起的;因此减少实验过程中的摩擦可以减少静电的产生,此外在秋冬季节,适当增加空气湿度,可吸收静电;金属可导电,可以在做完实验后定期接触金属制品导走身上的静电。
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问
关于PCR实验中酶的问题?
dxyc42u
单管震荡容易产生气泡不好加样。
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问
解剖取出的小鼠肠道清洗方法 求助!
土井挞克树
用注射器注满水从肠道一段灌洗小肠,不要用镊子暴力操作,会影响上皮细胞。
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问
病毒纯化
dxyc42u
建议去已发表论文中看看,比如这篇
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问
xena数据库里的download怎么不见了
dxyc42u
我一般都是通过代码下载数据的。
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问
明胶酶谱法
dxyc42u
实验步骤1.取对数期的癌细胞在的无血清培养基DMEM中培养24h。2.次日收集上清液,将上清液移入离心管中 2000rpm 离心10min,-70℃储存备用。3.根据细胞计数调整各组细胞培养上清液中的蛋白浓度(或者测定蛋白浓度调整使所上蛋白总量一致)。与5×上样缓冲液混合,13ul样本+4ul上样缓冲液。(不要用枪用力吹打,防止出现过多气泡)4.配制分离胶和浓缩胶,16ul/孔上样(根据表达强度和
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问
A549培养
dxyc42u
看起来细胞聚团还挺多的,应该滴加了血清的缘故
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问
求助,实验大鼠生虫
huarenqiang5
考虑是蠕虫(如绦虫、蛲虫和蛔虫)。
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问
植物组织提取rna
dxyc42u
建议增大一点离心力试试看咋样。
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问
网络药理学与蛋白组学结果不一致
dxyc42u
网络药理学分析出来的结果只是一个预测结果,最终以蛋白组学分析出来的结果为主
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问
HLA过表达
dxyc42u
除了质粒还有其他办法,可以参考下这篇文献,
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