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实验问答

25,278,146 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问小白:把基因分为高低表达组，可以依据原始的counts数据分组吗？比较不同组别的基因表达情况，可以直接比较原始的count数据吗

huarenqiang5

可以依据原始的counts数据分组。

4 回答1249 围观

问每次做wb都是黑乎乎一片

loveliufudan

WB中出现黑色的背景可能是由多种因素导致的。下面是一些可能的原因：1.过量的抗体：使用过量的抗体可能会导致非特异性结合，从而导致高背景值。2.不当的洗膜条件：使用过于粗糙或过于缓慢的洗膜步骤可能会导致高背景值。3.抗体过时或受损：过时或受损的抗体可能会导致高背景值。4.蛋白质降解：样品中蛋白质降解可能会导致高背景值。5.膜过于湿润：膜过于湿润可能会导致高背景值6.检测抗体非特异性结合: 分子量1

3 回答28593 围观

问干预研究，自身前后对照，结局为连续变量，如何计算样本量

loveliufudan

如果没有找到类似文献获取总体样本的均值和标准差，那么可以考虑进行预实验来估计这些参数。预实验的样本量取决于研究的类型和目的，通常可以使用10-20个样本进行预实验。另外，还有其他计算方法可以考虑，如：1.Wilcoxon符号秩和检验：非参数性的统计检验，用于检验两个样本的中位数是否相等。2.Mann-Whitney U检验：非参数性的统计检验，用于检验两个样本中值是否相等。3.Kruskal-Wa

1 回答3601 围观

问生存分析。求救！

loveliufudan

倾向匹配 (propensity score matching) 是一种统计学方法，用于在对照组和实验组之间建立相似的个体特征，从而减少因为纵向关系而导致的偏差。在倾向匹配之后，两组手术例数不一定相等，但是两组之间的基本特征应该是相似的。在单因素分析中，手术方式可能是一个重要的因素，因为不同的手术方式可能会对病人的预后产生影响。然而，在倾向匹配后，两组之间的基本特征应该是相似的，所以进行单因素分析

2 回答526 围观

问山东医药投稿

蓝莓小布丁

不是退稿，初审复审均已通过，接下来等待编辑部的处理结果即可

2 回答2966 围观

问中国中医基础医学杂志投稿

蓝莓小布丁

系统无法登录可能是系统维护等技术性问题，可以发邮件或电话咨询一下杂志社。

2 回答512 围观

问Chip提纯DNA问题

dxy_9rkll7e2

当你的DNA浓度太低的时候，A260/A280等参数是测不准的，这个是没关系的，正常建库测序即可

2 回答1582 围观

问求内皮tip cell诱导分化方案

loveliufudan

人脐静脉内皮细胞 (HUVEC) 诱导分化为 tip cell 一直未获成功可能是由于多种因素导致的。下面是一些可能的原因：1.培养条件不当：tip cell 的分化需要较低氧气水平和较高细胞密度。2.培养基成分不当：tip cell 的分化需要特定的成分如血管内皮生长因子 (VEGF) 。3.细胞源问题：不同的细胞源可能会对分化结果产生影响。4.分化方法问题：tip cell 的分化需要特定的分

2 回答465 围观

问293T 包病毒求助

loveliufudan

可能是由于转染过程中的毒性或者质粒过量导致的。293T细胞转染时,很容易因为质粒过量或者质粒毒性而导致细胞不能正常生长。细胞变圆可能是因为细胞膜受损或者细胞死亡。建议减少质粒的转染量，或者使用更低的转染浓度，并在转染后尽早换新培养基，来改善细胞的生长状态。

3 回答2387 围观

问请教大小鼠前庭冰冻切片包埋时的摆放位置，和切片的方向，求高人指点，救救孩子吧！

loveliufudan

前庭冰冻切片包埋时，摆放位置和切片方向对于观察组织结构是很重要的。1.摆放位置：通常将组织放在切片中心，以便获得较好的观察质量。2.切片方向：通常从组织的中央切片，以便获得最佳的观察质量。3.球囊和椭圆囊的囊斑：一般可以在同一张片子上观察到。4.毛细胞的形态：毛细胞是很小的，需要使用高倍镜察看，如果不能看到可以考虑重新切片，使用更细的刀片，或者重新包埋。需要注意的是，摆放位置和切片方向可能会因实验

3 回答718 围观

问大鼠胼胝体取材

loveliufudan

分离大鼠脑胼胝体的方法通常包括使用微剖技术。微剖技术包括使用高倍镜和精细的手工技巧来切开大脑组织，以便找到并分离出胼胝体。确定胼胝体位置的方法包括使用脑图谱和免疫组化。脑图谱是一种解剖学工具，可以帮助确定大脑中不同部位的位置。免疫组化是一种生物学技术，可以使用特殊的抗体来确定大脑中特定细胞类型的位置。在实验中，需要找到大鼠脑的位置并确定前额叶和顶叶区域，然后进行微剖，找到胼胝体。另外，在分离胼胝体

2 回答1937 围观

问不同种属来源小鼠BMDC能否识别肿瘤OVA

loveliufudan

如果用 BALB/c 来源的肿瘤细胞系构建的带 OVA 的细胞株与 C57 来源的 BMDC 共培养，可能会检测到 BMDC 摄取并在膜上呈递 OVA-MHC1。BMDC 是一种具有免疫活性的细胞，它们可以通过摄取外来抗原来诱导免疫反应。在共培养的过程中，BMDC 可能会摄取带 OVA 的肿瘤细胞，并在其膜上呈递 OVA-MHC1。然而，这种情况的可能性并不是100%，还需要进一步的实验证明。需要

1 回答685 围观

问RAW巨噬细胞极化求助

loveliufudan

这种情况可能是由于细胞在当前状态下对LPS刺激的反应较少。可以考虑以下几种方法来改变细胞的反应性:1.选择不同类型的刺激物，例如IFN-γ或TNF-α等。2.尝试使用不同浓度的LPS刺激细胞，试验不同时间长度。3.尝试使用其他细胞激活剂，例如PMA或ionomycin等。4.尝试使用其他细胞系或细胞来源。5.检查培养条件，确保细胞在适当的温度和湿度条件下培养。6.选择培养细胞时机，确保细胞处于适当

1 回答3389 围观

问自噬抑制剂CQ和3A如何选择？

loveliufudan

选择哪种抑制剂，取决于研究目的和细胞类型。如果研究目的是抑制细胞内酸性环境下的自噬，那么选用CQ。如果研究目的是抑制类似于胞质自噬的途径，那么选用3-MA。或者研究目的是研究自噬在细胞内的不同途径，那么两种抑制剂都需要使用。需要注意的是，在使用自噬抑制剂时，需要根据实验需要，选择合适的剂量和时间。需要在使用之前对细胞的敏感性进行验证。

2 回答3229 围观

问IPSC培养问题

loveliufudan

可能是由以下原因导致的。1.细胞密度过高：如果细胞密度过高，细胞间的竞争会导致细胞质量下降。2.温度过低或过高：细胞对温度敏感，温度过低或过高都会影响细胞生长和增殖。3.氧气浓度过高或过低：细胞对氧气浓度敏感，氧气浓度过高或过低都会影响细胞生长和增殖。4.污染：细胞容易受到细菌、酵母、霉菌等微生物的污染，影响细胞生长和增殖。5.培养基不新鲜或过期：培养基过期或不新鲜可能导致细胞质量下降。6.培养基

2 回答992 围观

问请问，snu449细胞容易成瘤？

huarenqiang5

比较容易成瘤，细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。传代比例初次传代建议1：2传代（1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿）。一管细胞建议接种到10cm培养皿或者T25瓶。

2 回答810 围观

问已经确定诱导纯化出来的菌，隔段时间去纯化，洗脱后液体浓度降低，求大佬指导

loveliufudan

一.可能是由于以下几种原因：1.细菌繁殖过程中可能有细菌死亡或活性下降，导致细菌数量减少。2.细菌在培养过程中可能发生了某种程度的滴落，导致细菌数量减少。3.也可能是细菌在洗脱过程中被洗脱液吸收或洗脱不彻底导致。二.1.使用过的 GST 柱子可能会对其他蛋白的纯化产生影响。这个柱子以前没有纯出来东西的原因可能是因为没有选择合适的蛋白进行纯化，或者没有调整适当的条件（例如浓度，pH值）。2.使用过的

2 回答404 围观

问两种不同细胞共培养的培养基选择

loveliufudan

可以考虑使用组合培养基，如将DMEM和1640培养基混合使用，根据不同细胞类型的生长需求调整比例。或者使用组合培养基，如EBM-2或M199, 其中含有足够的氧气和营养物质来支持两种细胞的生长。不过还需要添加必要的补充物如EGF和bFGF来促进树状细胞的生长。

2 回答1049 围观

问请问pcR大神核酸CT值

勇往无前G66G

有影响，取样要尽量完美操作，提高纯度。

5 回答662 围观

问coip实验结果coip组两条带原因？

loveliufudan

可能是由于以下几种原因：1.A 蛋白和 B 蛋白之间存在多种相互作用方式，如直接相互作用、间接相互作用或通过第三方蛋白质进行相互作用。2.A 蛋白和 B 蛋白之间存在非特异性相互作用。3.在 A 蛋白和 B 蛋白之间存在负调控关系。4.A蛋白自身有多余的结合位点，导致自结合的情况5.在实验中，Co-IP的抗体杂质或者不纯的可能导致结果不准确。6.实验流程中可能有误差，如抗体结合不足，结合过多等。这

2 回答1914 围观

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