转染质粒

1.转染试剂的选择，

2.转染时间的确定和换液的时间确定，

3.细胞培养的血清浓度可以适当提高。

在293T细胞中同时转染多个质粒时，可以考虑以下几种方法来提高细胞中质粒的表达率：

1.高效转染：使用高效的转染方法，如脂质体转染或质粒聚合体转染，来提高质粒的转染效率。

2.选择合适的转染时间：在细胞被转染后的早期进行细胞培养可以提高质粒表达率。

3.优化培养条件：细胞生长状态良好时表达率会更高，因此优化培养条件，如提供足够的氧气和营养，控制细胞密度等。

4.使用高效的表达载体：选择高效的表达载体，如高效组织特异性表达的质粒，来提高质粒表达率。

5.使用质粒的表达调控元件：使用能够增强质粒表达的转录调控元件，如强烈的启动子、转录调节元件和组织特异性转录调节元件。

6.使用多质粒转染系统：使用带有不同转录调控元件的多质粒转染系统，可以提高细胞同时表达两个质粒的率。

注意以下几点：

1.转染后6小时更换新鲜培养基可以提高一些生长较快的细胞的转染效率。

2. 使用高的纯度 DNA (A260/A280=1.8) 有助于获得较高的转染效率。

3.建议使用质量较高的无内毒素质粒提取试剂盒进行质粒提取。

4.转染前细胞要处于良好的生长状态。

5.LipoGene 或Lipofectamine脂质体转染试剂不能涡旋或离心。

6.当该试剂放置较长时间时，只需轻轻摇晃并混合即可。

7. 试剂不要长时间暴露在空气中。